Question

【題目】[生物——選修3：現代生物科技專題]下圖是利用基因工程辦法生產人白細胞干擾素的基本過程圖，據圖回答：

（1）一般將受體大腸桿菌用__________________處理，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為__________________。

（2）②物質是從大腸桿菌分離出__________________。其化學本質是__________________，它必須能在宿主細胞中_________________。

（3）檢測干擾素基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是__________________。

（4）若將干擾素基因重組后導入牛的受精卵，獲得能產生干擾素的轉基因牛，也可大大提高干擾素的產量，請回答以下問題：

①利用______________酶將干擾素基因與牛乳腺蛋白基因的啟動子（即RNA聚合酶結合的部位）等調控組件連接在一起。

②基因工程操作過程的實現至少需要三種必要的工具，其中與“限制性核酸內切酶”作用部位完全相同的酶是___________。

Answer 1

【答案】 CaCl2 感受態(tài)細胞 質粒 DNA 復制并穩(wěn)定地保存 采用DNA-RNA分子雜交技術，檢測目的基因是否轉錄形成mRNA DNA連接酶 DNA連接酶

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞 ④目的基因的檢測與鑒定。基因工程的工具有：限制性核酸內切酶、DNA連接酶和運載體．需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體。將目的基因導入原核細胞，常用CaCl2處理以增加細胞壁的通透性，變成感受態(tài)細胞，能吸收周圍的DNA分子。

（1）大腸桿菌作為受體細胞，常用Ca2+處理法，使其成為感受態(tài)細胞，在一定溫度條件下完成轉化。
（2）②物質是從大腸桿菌分離出的質粒，其化學本質是小型環(huán)狀DNA分子，它必須能在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存。
（3）檢測干擾素基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是采用DNA-RNA分子雜交技術，檢測目的基因是否轉錄形成mRNA，

（4）①要將目的基因和運載體連接需要DNA連接酶的催化。

②基因工程中常用到的必須的工具是限制酶、DNA連接酶和運載體，限制性核酸內切酶作用的是切開DNA的磷酸二酯鍵，DNA連接酶是將此處的磷酸二酯鍵連接起來。