Question

7．將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)�入馬鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。

表1   引物對(duì)序列表

表2  幾種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)數(shù)

請(qǐng)根據(jù)以上圖表回答下列問題。

（1）在采用常規(guī)PCR方法擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點(diǎn)是__________。

（2）PCR過程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表1根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物序列，圖2為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可采用較高的退火溫度？________________________________________。

（3）圖1步驟3所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？                            

（4）PCR反應(yīng)中由堿基錯(cuò)配引起的變異來源于__________。假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測所有DNA的擴(kuò)增片段與原DNA相應(yīng)片段相同的是__________。

（5）對(duì)符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒T進(jìn)行酶切，假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開，請(qǐng)根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表2所列的識(shí)別序列，對(duì)以下酶切結(jié)果作出判斷。

①采用EcoRI和PstI酶切，得到__________種DNA片段。

②采用EcoRI和SmaI酶切，得到__________種DNA片段。

Answer 1

解析：本題考查了DNA重組技術(shù)，基因工程的基本操作，PCR技術(shù)、基因突變的來源、堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則等有關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)。

答案：（1）耐高溫 

（2）引物對(duì)B 

（3）否 

（4）基因突變  1/2

（5）2  1