Question

利用動物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為動物乳腺反應(yīng)器技術(shù)。2005年山東省青島“嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的研制”項(xiàng)目通過鑒定，該項(xiàng)目生產(chǎn)的藥用蛋白具有表達(dá)效率高、成本低、安全性高、易于分離純化的優(yōu)點(diǎn)，可產(chǎn)生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等醫(yī)藥產(chǎn)品，造福人類健康。下圖為利用生物技術(shù)獲得生物這一新品種和抗蟲棉的過程，據(jù)圖回答：

（1）在基因工程中，A表示         ，如果直接從蘇云金桿菌中獲得抗蟲基因，①過程使用的酶區(qū)別于其他酶的特點(diǎn)是                                           。

（2）在研究過程中，研究人員首先從相關(guān)基因組中獲取了目的基因，并采用      技術(shù)對目的基因進(jìn)行了擴(kuò)增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體組合形成了重組載體。在重組載體的構(gòu)建過程中需要的工具酶有                  、                。

（3）基因工程的四個基本操作步驟是目的基因的獲取、                、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞和                 。若要獲得的轉(zhuǎn)基因山羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種山羊                 及其啟動子、終止子、標(biāo)記基因、            和復(fù)制原點(diǎn)等。

（4）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程中，在③過程中一般是采用          方法，但我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)了           獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，在②過程中一般采用         方法，受體細(xì)胞一般是          。

（5）由于轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中，檢測其體內(nèi)是否出現(xiàn)藥用蛋白，在分子水平上的檢測方法及結(jié)果是什么?

檢測方法是：從轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中提取         ，用                ；

預(yù)測結(jié)果是：如果出現(xiàn)雜交帶，表明                          。

（6）要確定目的的基因（抗蟲基因）導(dǎo)入棉花細(xì)胞后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測和鑒定工作，請寫出在個體水平上的鑒定過程：                         。

（7）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是_____________      。

Answer 1

（1）目的基因  一種限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開（或一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子）

（2）PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） 限制酶   DNA連接酶

（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建    目的基因的檢測與鑒定   乳腺分泌蛋白基因     人抗凝血酶Ⅲ基因

（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法  花粉管通道法   顯微注射技術(shù)   受精卵

（5）蛋白質(zhì)   相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交   山羊的乳汁中出現(xiàn)了藥用蛋白

（6）讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子，觀察害蟲的存活情況，以確定其是否具有抗蟲性狀。

（7）使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用