Question

【題目】P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，研究表明P53基因突變可導(dǎo)致肝臟細(xì)胞癌變．科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)P53基因?qū)�體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞生長有抑制作用，請(qǐng)回答下列問題：
（1）切下新鮮的肝癌組織，在37℃下用消化30﹣40分鐘，在5%培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)基是模擬了人體的成分配制的，在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是 ．
（2）獲取P53基因的方法通常包括和 ．
（3）將P53基因經(jīng)過一系列的處理并與脂質(zhì)體混合，將混合物滴加至肝癌細(xì)胞上，輕輕混勻．最后篩選出含有P53基因的肝癌細(xì)胞．脂質(zhì)體在這個(gè)操作中的作用是 ．
（4）為證明P53基因有抑癌作用，需將兩種細(xì)胞接入多孔板中，并從次日開始檢測每孔的細(xì)胞總數(shù)，繪制成如圖所示的生長曲線．請(qǐng)分析兩條曲線分別是哪種細(xì)胞，曲線1是細(xì)胞，曲線2是細(xì)胞．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶；CO2；內(nèi)環(huán)境；防止雜菌污染
（2）化學(xué)方法合成；從基因文庫中獲取
（3）將P53（目的）基因?qū)�入肝癌�?xì)胞
（4）肝癌細(xì)胞；轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌細(xì)胞
【解析】解：（1.）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶處理組織，使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：①無菌、無毒的環(huán)境：消毒、滅菌；添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．②營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．③溫度和PH．④一定的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）．
（2.）獲取目的基因（P53基因）的方法通常包括化學(xué)方法合成和從基因文庫中獲取．
（3.）脂質(zhì)體在這個(gè)操作中的作用是將P53（目的）基因?qū)�入肝癌�?xì)胞．
（4.）P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，所導(dǎo)入P53基因的肝癌細(xì)胞數(shù)目下降，而普通肝癌細(xì)胞能無限增殖，其數(shù)目不斷上升，即曲線1是肝癌細(xì)胞，曲線2是轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌細(xì)胞．
【考點(diǎn)精析】通過靈活運(yùn)用基因工程的原理及技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)；取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)即可以解答此題．