Question

【題目】利用某高致病性病毒特異性的VP40抗原蛋白來制備單克隆抗體的流程圖如下，請回答：

（1）過程①利用質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，質(zhì)粒的來源主要是___________，質(zhì)粒能夠在受體細(xì)胞中________，是其作為運(yùn)載體的原因之一。

（2）過程②用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于___________。在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素，能獲得含有目的基因的受體菌，原因是___________�？梢岳�用___________檢測VP40基因是否進(jìn)入大腸桿菌。

（3）用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是___________；對雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行___________培養(yǎng)和抗體檢測，最終獲得單克隆抗體。

Answer 1

【答案】 細(xì)菌、酵母菌等 自我復(fù)制和穩(wěn)定存在 感受態(tài) 質(zhì)粒上有四環(huán)素抗性基因（或“受體菌獲得抗四環(huán)素的特性”） VP40基因探針 （或DNA分子雜交技術(shù)） 在體外培養(yǎng)條件下能無限增殖且能產(chǎn)生單一成分的抗體 克隆化

【解析】據(jù)圖分析，①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程，②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（大腸桿菌）的過程，③表示目的基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)過程，④表示誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程。

（1）質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體，主要來源于細(xì)菌、酵母菌等，其作為運(yùn)載體的原因之一是能夠在受體細(xì)胞中自我復(fù)制和穩(wěn)定存在。

（2）過程②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（大腸桿菌）的過程，一般需要用鈣離子處理，使得大腸桿菌處于感受態(tài)，以便目的基因的導(dǎo)入。由于質(zhì)粒上有四環(huán)素抗性基因，所以在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素，能獲得含有目的基因的受體菌；檢測目的基因（VP40基因）是否進(jìn)入大腸桿菌可以用DNA分子雜交技術(shù)（VP40基因探針）。

（3）雜交瘤細(xì)胞是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的，具有兩個細(xì)胞的遺傳特性，因此其在體外培養(yǎng)條件下能無限增殖且能產(chǎn)生單一成分的抗體；對雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，最終獲得單克隆抗體。