Question

【題目】綠色熒光是由綠色熒光蛋白發(fā)出的,為培育能發(fā)出綠色熒光的小鼠,人們?cè)O(shè)計(jì)了如下的流程：

（1）獲取綠色熒光蛋白基因的常用方法有從基因文庫(kù)中獲取和_____________________等。

（2）綠色熒光基因通�？梢詮幕�因文庫(kù)中獲取,含有一種生物一部分基因的文庫(kù)稱為_______________________。

（3）A過(guò)程是基因工程的核心,常用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和_______________________, 它們作用的化學(xué)鍵是_____________________。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因和復(fù)制原點(diǎn)外，還必需有__________________,__________________以及標(biāo)記基因。

（4）B過(guò)程常用的方法是______________________。

（5）通常采用_________________________技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組

Answer 1

【答案】人工合成cDNA文庫(kù)（部分基因文庫(kù)）DNA連接酶磷酸二酯鍵啟動(dòng)子終止子顯微注射技術(shù)DNA分子雜交技術(shù)

【解析】

分析題圖：圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程，其中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，B表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，C表示早期胚胎培養(yǎng)，D表示胚胎移植，E表示妊娠。

（1）獲取目的基因——綠色熒光蛋白基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取和人工通過(guò)化學(xué)方法合成等。

（2）基因文庫(kù)分為基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)，其中含有一種生物所有基因的文庫(kù)稱為基因組文庫(kù)，含有一種生物的部分基因的文庫(kù)稱為部分基因文庫(kù)，如cDNA文庫(kù)。

（3）A過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心，常用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，它們作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。基因表達(dá)載體的組成包括目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因，所以用于培育綠色熒光小鼠的基因表達(dá)載體的組成必須有啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等部分。

（4）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞采用最多也最有效的方法是顯微注射技術(shù)。

（5）檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組，通常采用DNA分子雜交技術(shù)，即用外源基因制作成的DNA探針與受體細(xì)胞的基因組進(jìn)行雜交，觀察是否出現(xiàn)雜交帶。