Question

29、科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過(guò)程中，需使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC— ，限制性核酸內(nèi)切酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—，據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程①所需要的酶是　　　　　。

（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶     　切割質(zhì)粒，用限制性核酸內(nèi)切酶   　  切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體后形成的黏性末端通過(guò)___________     原則進(jìn)行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是          　　　    。

（3）在過(guò)程③一般將受體大腸桿菌用_________處理，以增大　　　　　的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞。

（4）將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上得到如下圖a的結(jié)果（黑點(diǎn)表示菌落），能夠生長(zhǎng)的細(xì)菌中已導(dǎo)入了             ，反之則沒(méi)有導(dǎo)入；再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上，使絨布表面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖b的結(jié)果（空圈表示與a對(duì)照無(wú)菌落的位置）。與圖b空圈相對(duì)應(yīng)的圖a中的菌落表現(xiàn)型是                 ，這些細(xì)菌中導(dǎo)入了________________。

（5）人體的生長(zhǎng)激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)?u>                         。寫(xiě)出目的基因?qū)�入�?xì)菌中表達(dá)的過(guò)程                                     。

Answer 1

解析：考查基因工程的基本操作程序的相關(guān)知識(shí)，用限制性內(nèi)切酶切割DNA可以產(chǎn)生粘性末端，用大腸桿菌作為受體細(xì)胞時(shí)，要用Ca²⁺處理，以利于表達(dá)載體進(jìn)入，檢測(cè)基因的表達(dá)。

答案：

29、（1）逆轉(zhuǎn)錄酶　�。�2）I　　II  　堿基互補(bǔ)配對(duì)　　人的基因與大腸桿菌DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)相同　　（3）CaCl₂　  細(xì)胞壁　�。�4）普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒  　抗氨芐青霉素和四環(huán)素抗性　　重組質(zhì)粒　�。�5）共用一套密碼子   生長(zhǎng)激素基因——>mRNA——>生長(zhǎng)激素