Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題。

（一）某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑，開展了該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘，其目的是篩選出_______________。

（2）在無(wú)菌條件下，將經(jīng)過(guò)處理的土壤懸液進(jìn)行______________，然后涂布在含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到______________，其周圍出現(xiàn)透明水解圈，______________比值大小與該菌所產(chǎn)植酸酶數(shù)量多少、活性強(qiáng)弱相關(guān)。

（3）篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)需要振蕩，其主要目的是______________。

（4）常用固定化植酸酶處理飼料，其主要優(yōu)點(diǎn)有________________________和可連續(xù)處理等。在建立和優(yōu)化固定化植酸酶處理工藝時(shí)，除考慮_________________________、酶反應(yīng)的溫度、pH、作用時(shí)間等環(huán)境因素外，還需考慮的主要有固定化的方法和固定化________________。

（二）人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知目前全世界流行的新型冠狀病毒為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和單克隆抗體制備的流程之一如圖所示。請(qǐng)據(jù)圖分析并回答下列問(wèn)題：

（1）在基因工程中，圖中A蛋白基因?qū)儆?/span>__________基因。

（2）圖示B淋巴細(xì)胞來(lái)自__________（填器官），小鼠骨髓瘤細(xì)胞可以通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)形成不死性的____________________。

（3）過(guò)程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是__________，獲得的X是__________。

（4）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的__________所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行____________________比較，或用圖中的____________________進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。

Answer 1

【答案】耐高溫菌株 稀釋 單菌落 透明圈與菌落的直徑 增加培養(yǎng)液溶解氧 提高植酸酶的穩(wěn)定性 植酸酶的活性和用量 所用的介質(zhì) 目的 脾臟 癌細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 A蛋白 核酸序列 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】

1、微生物的篩選與分離需要使用選擇培養(yǎng)基.常用的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法.固定化酶和固定化細(xì)胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法.影響酶的活性的因素主要有溫度和pH等。

2、分析題圖：圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；②是獲取目的基因；③是小鼠骨髓瘤細(xì)胞和效應(yīng)B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程；X為雜交瘤細(xì)胞。

（一）（1）土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘，目的是使大多數(shù)的不耐高溫的微生物死亡而篩選出耐高溫菌株。

（2）土壤懸液在無(wú)菌條件下進(jìn)行梯度稀釋，使用稀釋涂布平板法接種涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后可以觀察到單菌落的出現(xiàn)，且出現(xiàn)透明圈，透明圈與菌落的直徑比值大小與該菌所產(chǎn)植酸酶數(shù)量多少、植酸酶的活性強(qiáng)弱相關(guān)。.

（3）振蕩培養(yǎng)的目的是向培養(yǎng)液供氧，同時(shí)使微生物與培養(yǎng)液充分接觸，有利于微生物的繁殖與生長(zhǎng)。

（4）常用固定化植酸酶處理飼料，其主要優(yōu)點(diǎn)有提高植酸酶的穩(wěn)定性和可連續(xù)處理等。在建立和優(yōu)化固定化植酸酶處理工藝時(shí)，除考慮植酸酶的活性和用量、酶反應(yīng)的溫度、pH、作用時(shí)間等環(huán)境因素外，還需考慮的主要有固定化的方法和固定化所用的介質(zhì)。

（二）（1）在基因工程中，圖中A蛋白基因?qū)儆谀康幕�因�?/span>

（2）對(duì)小鼠進(jìn)行注射A蛋白抗原，一段時(shí)間后從小鼠脾臟提取出B淋巴細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞可以通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)形成不死性的癌細(xì)胞。

（3）③是動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程，需采用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；經(jīng)過(guò)獲得的融合細(xì)胞有3種，即骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，圖中X就是雜交瘤細(xì)胞。

（4）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗.對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較；或采用抗原-抗體雜交法，即用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。