【題目】幾丁質(zhì)是構(gòu)成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分，高等動(dòng)植物和人類體內(nèi)不含幾丁質(zhì)。某些微生物能合成幾丁質(zhì)酶（胞外酶），將幾丁質(zhì)降解為N-乙酰氨基葡萄糖�？蒲腥藛T通過微生物培養(yǎng)獲得幾丁質(zhì)酶，用于生物防治�；卮鹣铝袉栴}。

（l）幾丁質(zhì)酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢(shì)是____。

（2）欲篩選幾丁質(zhì)酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入幾丁質(zhì)，為微生物提供____。菌株接種前對(duì)培養(yǎng)基滅菌，殺死培養(yǎng)基內(nèi)外 _______。菌株篩選成功后，可將培養(yǎng)的菌液與滅菌后的 ___混合，在-20℃長(zhǎng)期保存。

（3）將篩選出的菌株接種到培養(yǎng)基中，30℃恒溫振蕩培養(yǎng)至幾丁質(zhì)降解完全，得到幾丁質(zhì)酶發(fā)酵液，將其離心，保留_________（填“上清液”或“沉淀”），獲得粗酶樣品；在膠體幾丁質(zhì)固體培養(yǎng)基上打孔，將粗酶樣品加入孔內(nèi)，恒溫靜置8h，根據(jù)透明圈的大小可判____________________。

（4）通過SDS -___ 法進(jìn)行幾丁質(zhì)酶樣品純度檢測(cè)，加入SDS的目的是____。

【答案】無毒、無污染 碳源、氮源 所有的微生物，包括芽孢和孢子 甘油 上清液 幾丁質(zhì)酶活力的高低 聚丙烯酰胺凝膠電泳 使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性；消除凈電荷對(duì)遷移率的影響

【解析】

1、培養(yǎng)基的成分：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。培養(yǎng)基按照用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基具有能夠滿足篩選微生物正常生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或條件，而不利于非篩選微生物的生長(zhǎng)。而獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，因此采用無菌技術(shù)避免雜菌的污染，對(duì)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌處理，目的是殺傷物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

2、凝膠色譜法原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。

（1）幾丁質(zhì)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，其作用主要是降解幾丁質(zhì)，而幾丁質(zhì)是構(gòu)成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分，且高等動(dòng)植物和人類體內(nèi)不含幾丁質(zhì)，幾丁質(zhì)酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢(shì)是無污染。

（2）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基必不可少的條件是碳源、氮源、無機(jī)鹽、水、適宜pH以及溫度等。要篩選幾丁質(zhì)酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入幾丁質(zhì)作為微生物營(yíng)養(yǎng)來源，幾丁質(zhì)為N-乙酰葡糖胺通過β-1，4-糖苷鍵連接聚合而成的多糖，為其提供碳源和氮源。微生物的接種過程需要嚴(yán)格無菌操作，防止菌株受到污染，在菌株接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基滅菌，殺死培養(yǎng)基內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。污染菌液的長(zhǎng)期保存應(yīng)隔絕空氣，防止受到其他污染，通常在菌株篩選成功后，將培養(yǎng)的菌液與滅菌的甘油混合，在-20℃長(zhǎng)期保存。

（3）將幾丁質(zhì)發(fā)酵液離心，重的菌株沉淀在底部，而粗酶樣品分布于上清液；通過觀察固體培養(yǎng)基上是否產(chǎn)生透明圈來確定菌株是否具有降解幾丁質(zhì)的酶活性，而透明圈的大小指幾丁質(zhì)酶活力的高低。

（4）幾丁質(zhì)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)樣品純度檢測(cè)采用的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子大小等因素，為了消除凈電荷對(duì)遷移率的影響，可以在凝膠中加入SDS。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】人口劇增帶來了環(huán)境污染、生物多樣性降低、可耕地減少等眾多世界性難題，為了解決糧食生產(chǎn)和環(huán)境保護(hù)問題，實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，下列措施可行的有（ ）

①控制人口增長(zhǎng)，協(xié)調(diào)人與自然和諧發(fā)展

②合理開發(fā)海洋，尋找新的糧食資源

③發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)，實(shí)現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級(jí)利用

④增加化肥和農(nóng)藥的使用，提高作物產(chǎn)量

⑤開荒辟地，圍湖造田，擴(kuò)大糧食種植面積

⑥利用現(xiàn)代生物技術(shù)，培育高產(chǎn)作物品種

A.兩項(xiàng)B.三項(xiàng)

C.四項(xiàng)D.五項(xiàng)

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列關(guān)于反射弧的敘述，正確的是（ ）

A.刺激某一反射弧的感受器或傳入神經(jīng)，最終都能引起反射

B.反射弧中的感受器和效應(yīng)器均分布于機(jī)體同一組織或器官

C.反射弧中某一環(huán)節(jié)受損，反射活動(dòng)仍有可能實(shí)現(xiàn)

D.反射活動(dòng)中，興奮在神經(jīng)纖維上只能單向傳導(dǎo)

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】群落是一定區(qū)域內(nèi)的各種生物種群的集合。有關(guān)群落的敘述，正確的是（ ）

A.群落的水平結(jié)構(gòu)常常是由地形變化等因素引起

B.研究群落首先要研究的是群落的豐富度

C.一片竹林中竹林有高有矮，屬于群落的垂直結(jié)構(gòu)

D.一個(gè)地區(qū)冬天的生物種群和夏天的生物種群組成一個(gè)群落

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列關(guān)于免疫調(diào)節(jié)的敘述中錯(cuò)誤的一項(xiàng)是（ ）

A.人體內(nèi)產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞

B.人類免疫缺陷病毒（HIV）主要攻擊人體的T淋巴細(xì)胞

C.效應(yīng)T細(xì)胞能夠與靶細(xì)胞密切接觸使其裂解死亡

D.機(jī)體自身的組織和細(xì)胞不可能成為抗原

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】長(zhǎng)跑比賽中，運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)多種生理過程發(fā)生了改變。

（1）機(jī)體產(chǎn)熱大量增加，通過________調(diào)節(jié)，引起皮膚__________________和___________增強(qiáng)，導(dǎo)致散熱加快以維持體溫的相對(duì)恒定。

（2）機(jī)體大量出汗導(dǎo)致失水較多，刺激____________感受器，引起__________釋放抗利尿激素，繼而促進(jìn)________________________________，以維持體內(nèi)的水鹽平衡。

（3）機(jī)體血糖大量消耗的主要途徑是____________，此時(shí)骨骼肌細(xì)胞的直接供能物質(zhì)是____。

（4）比賽結(jié)束后，運(yùn)動(dòng)員可適量補(bǔ)充水分以清除由于_________________滲透壓升高引起的渴感，還可通過積極放松的方式緩解因肌肉細(xì)胞中________積累過多造成的肌肉酸痛。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】向日葵和番茄都能產(chǎn)生果實(shí)和種子，向日葵的果實(shí)．就是平時(shí)我們吃的“瓜子”。在上述兩種植物開花期間，遇到了連續(xù)的陰雨天，影響了植物的授粉。管理人員及時(shí)噴灑了一定濃度的生長(zhǎng)素。下列敘述正確的是（ ）

A.兩種植物都能形成無籽果實(shí)，產(chǎn)量均未受影響

B.番茄形成無籽果實(shí)，產(chǎn)量未受影響；向日葵形成無籽果實(shí)，產(chǎn)量下降

C.兩種植物都能形成無籽果實(shí)，產(chǎn)量下降

D.番茄形成有籽果實(shí)，產(chǎn)量上升；向日葵不能形成無籽果實(shí)

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】二倍體動(dòng)物缺失一條染色體稱為單體。果蠅只缺失一條W號(hào)染色體可以存活，而且能夠繁殖后代，若缺失兩條W號(hào)染色體，則不能成活。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A.從變異類型來看，果蠅的單體屬于染色體數(shù)目變異

B.該種單體果蠅產(chǎn)生的配子中染色體數(shù)為3條或4條

C.果蠅基因組計(jì)劃測(cè)定的是5條染色體上DNA的堿基序列

D.若該種單體果蠅的雌雄個(gè)體交配，其存活后代中單體的概率為1/2

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列關(guān)于激素的敘述中，錯(cuò)誤的是（ ）

A.胰島素和抗體的分泌一樣，都能體現(xiàn)生物膜具有一定的流動(dòng)性

B.酶、激素和神經(jīng)遞質(zhì)都可以作為信息分子隨血液流向全身

C.激素只有與靶細(xì)胞的相應(yīng)受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用

D.激素含量過多或過少都可能引起內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的失衡

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