【題目】為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連，導入油菜細胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計引物，采用 技術(shù)從陸地棉基因文庫中獲取酶

D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因，所含三種限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切

點如下圖所示。則用 和 酶處理兩個基因后，可得到 端與

端（填圖中字母）相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右上圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建 并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含 的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是 。

（4）進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞，該細胞通過 技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。用 法在分子水平上可檢測轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達。

【答案】（1）PCR ClaⅠ DNA連接 A D

（2）基因表達載體（或“重組質(zhì)粒”） 四環(huán)素

（3）利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎?植物組織培養(yǎng)

（4）抗原—抗體雜交

【解析】（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計引物，采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因．在上述引物設(shè)計時，分別在引物中加入如圖甲所示酶的識別序列，這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后，得到A、D端相連的融合基因．

（2）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建表達載體即重組質(zhì)粒并導入農(nóng)桿菌中．將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液．

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎�，進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜．

（4）用抗原-抗體雜交法可檢測轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達．

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在治療人類某些疾病時，人的體細胞核移植技術(shù)得到的胚胎干細胞經(jīng)誘導分化，形成相應的組織器官后，可用于組織器官的移植，操作流程如圖所示．請回答下列問題：

（1）胚胎干細胞是從動物胚胎發(fā)育至囊胚期的_______或胎兒的_____中分離得到的一類細胞。

（2）圖中過程③④表示從囊胚中取出細胞。將其培養(yǎng)在____________細胞上能維持不分化的狀態(tài)，形成大量胚胎干細胞．圖中過程⑤在培養(yǎng)液中加入______，就可以誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化，用于患者的組織器官移植。

（3）在①前去除卵母細胞細胞核時普遍使用__去核法．圖中整個過程屬于_______克隆，中國對待克隆人的態(tài)度是____________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列屬于有氧呼吸與無氧呼吸相同點的是（ ）

A．都需要氧氣的參與 B．都在線粒體中進行

C．都能產(chǎn)生CO2和H2O D．都能產(chǎn)生ATP

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在鼠的胰腺腺泡細胞中，與分泌蛋白的合成、運輸、分泌有關(guān)的細胞器依次是（ ）

A．核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體 B．核糖體、中心體、高爾基體

C．核糖體、中心體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核糖體

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】酵母菌的維生素、蛋白質(zhì)含量高，可生產(chǎn)食品和藥品等�？茖W家將大麥細胞的LTP1基因?qū)肫【平湍妇校@得的啤酒酵母菌可產(chǎn)生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒。基本操作過程如圖所示，請據(jù)圖回答下列問題。

(1)該技術(shù)定向改變了酵母菌的性狀，這種可遺傳變異屬于________。

(2)從大麥細胞中可直接分離獲得LTP1基因，還可采用________方法獲得目的基因。本操作中為了將LTP1基因?qū)虢湍妇毎麅?nèi)，所用的載體是________。

(3)要使載體與LTP1基因連接，首先應使用______________進行切割。假如載體被切割后，得到的分子末端序列為AATTCG，則能與該載體連接的LTP1基因分子末端是__________。

A．GCTTAA　　　

B．TAATTCC

C．CTTTAG

D．AAATCT

(4)切割完成后，采用________酶將載體與LTP1基因連接，連接后得到的DNA分子稱為________________。

(5)此操作中可以分別用含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進行篩選，則有C進入的酵母菌在選擇培養(yǎng)基上的生長情況是______________________________________________________。

(6)除了看啤酒泡沫豐富與否外，還可用什么方法檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表達？

_____________________________________________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】學習、記憶是動物適應環(huán)境、使個體得到發(fā)展的重要功能。通過電刺激實驗，發(fā)現(xiàn)學習、記憶功能與高等動物的海馬腦區(qū)（H區(qū)）密切相關(guān)。

（1）在小鼠H區(qū)的傳入纖維上施加單次強刺激， 傳入纖維末梢釋放的_________________作用于突觸后膜的相關(guān)受體，突觸后膜出現(xiàn)一個膜電位變化。

（2）如果在H區(qū)的傳入纖維上施加100次/秒、持續(xù)1秒的強刺激（HFS），在刺激后幾小時之內(nèi)，只要再施加單次強刺激突觸后膜的電位變化都會比未受過HFS處理時高2~3倍，研究者認為是HFS使H區(qū)神經(jīng)細胞產(chǎn)生了“記憶”，下圖為這一現(xiàn)象可能的機制。

如圖所示，突觸后膜上的N受體被激活后，Ca2+會以_________________方式進入胞內(nèi)，Ca2+與_______________共同作用，使C酶的_______________發(fā)生改變，C酶被激活。

（3）為驗證圖中所示機制，研究者開展了大量工作，如：

①對小鼠H區(qū)傳入纖維施加HFS，休息30分鐘后，檢測到H區(qū)神經(jīng)細胞的A受體總量無明顯變化，而細胞膜上的A受體數(shù)量明顯增加，該結(jié)果為圖中的_______________（填圖中序號）過程提供了實驗證據(jù)。

②圖中A受體胞內(nèi)肽段（T）被C酶磷酸化后，A受體活性增強，為證實A受體的磷酸化位點位于T上，需將一種短肽導入H區(qū)神經(jīng)細胞內(nèi)，以干預C酶對T的磷酸化，其中，實驗組和對照組所用短肽分別應與T的氨基酸_______________

A．數(shù)目不同序列不同 B.數(shù)目相同序列相反 C.數(shù)目相同序列相同

③為驗證T的磷酸化能增強神經(jīng)細胞對刺激的“記憶”這一假設(shè)，將T的磷酸化位點發(fā)生突變的一組小鼠，用HFS處理H區(qū)傳入纖維，30分鐘后檢測H區(qū)神經(jīng)細胞突觸后膜A受體能否磷酸化，請評價該實驗方案并加以完善_______________。

（4）圖中內(nèi)容從_______________水平揭示學習、記憶的一種可能機制，為后續(xù)研究提供了理論基礎(chǔ)。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖為有甲、乙兩種單基因遺傳病的某家庭的遺傳系譜圖，已知甲病為伴X染色體隱性遺傳病，由A，a基因控制的，乙病為常染色體隱性遺傳病，由B、b基因控制。分析該系譜圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是

A. 系譜圖中①、③分別表示乙病男性、甲病男性

B. Ⅱ-5的基因型與Ⅱ-8的基因型相同的概率為1/3

C. Ⅱ-5和Ⅱ-6再生育一個患病孩子的概率為11/32

D. 正常情況下，Ⅰ-1的a基因可經(jīng)Ⅱ-4遺傳給Ⅲ-9

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】我國曾經(jīng)發(fā)生過因“非典型性肺炎”而死亡的病例，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，該病是由SARS病毒(一種RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作，其簡要的操作流程如圖：

(1)實驗步驟①所代表的反應過程是______________________。

(2)步驟②構(gòu)建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制酶和________酶，后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的S蛋白基因和________________連接起來。

(3)如果省略步驟②而將大量擴增的S蛋白基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能________________，也不能________________。

(4)為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用_________________與SARS康復病人血清進行抗原—抗體特異性反應實驗，從而得出結(jié)論。

(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是______________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列4種生物中，屬于原核生物的是（ ）
A.酵母菌
B.乳酸菌
C.草履蟲
D.水綿

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