Question

【題目】營養(yǎng)缺陷型菌株就是在突變后，微生物細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。以下是實(shí)驗(yàn)人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。請回答問題：

（1）過程①的接種方法為____________。培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____________。與基本培養(yǎng)基相比，待測培養(yǎng)皿中的特有的成分是________。釆用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是__________________。

（2）為了進(jìn)一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定，實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行了如下操作：①用接種針挑取_____（選填“菌落 A”或“菌落 B”）接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中，28℃振蕩培養(yǎng) 12 天后，離心，取沉淀物用________洗滌 3 次，并制成菌懸液。培養(yǎng)過程中振蕩的目的是____________________。

②吸取 lmL 菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，傾注 15mL 融化并冷卻至 4550℃的基本培養(yǎng)基，待其冷凝后用記號筆在皿底劃分五個區(qū)域，標(biāo)記為 A、B、C、D、E。

③在劃分的五個區(qū)域上放入少量分組的氨基酸粉末（如表所示），經(jīng)培養(yǎng)后，觀察生長圈出現(xiàn)的區(qū)域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。

組別	所含氨基酸
A	組氨酸	蘇氨酸	谷氨酸	天冬氨酸	亮氨酸
B	精氨酸	蘇氨酸	賴氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
C	酪氨酸	谷氨酸	賴氨酸	色氨酸	丙氨酸
D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	色氨酸	絲氨酸
E	半胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	絲氨酸

在上述鑒定實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基 B、C 區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬于___。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法 高壓蒸汽滅菌法 氨基酸 同種菌株的接種位置相同 菌落 A 無菌水 提高溶解氧、同時使菌體分散和營養(yǎng)物質(zhì)均勻分布，讓菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸 賴氨酸缺陷型

【解析】

分析題圖，圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，然后運(yùn)用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基，則在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株。

（1）根據(jù)過程①培養(yǎng)的效果圖可以判斷，該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。分析題圖，圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌。與基本培養(yǎng)基相比，待測培養(yǎng)皿中的特有的成分是氨基酸。釆用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是同種菌株的接種位置相同。

（2）為了進(jìn)一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定，①用接種針挑取菌落A接種并培養(yǎng)；離心后菌株存在于沉淀物中，為了防止雜菌污染，需取沉淀物用無菌水洗滌3次，并制成菌懸液。培養(yǎng)過程中振蕩的目的是提高溶解氧、同時使菌體分散和營養(yǎng)物質(zhì)均勻分布，讓菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸。

③表中信息顯示：B、C區(qū)域含有、其它區(qū)域不含有的氨基酸是懶氨酸，而實(shí)驗(yàn)結(jié)果只有B、C區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬懶氨酸缺陷型。