【題目】PCR擴(kuò)增過程示意圖如下，核心要素包括引物設(shè)計(jì)、溫度控制和模板DNA的獲得。請回答下列問題：

（1）欲構(gòu)建抗利尿激素的cDNA文庫，應(yīng)從________(組織)中提取________，通過________獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。

（2）設(shè)計(jì)一對與抗利尿激素基因兩端序列互補(bǔ)配對的引物時(引物1和引物2)，一般在引物的________端需要增加適當(dāng)?shù)南拗泼盖懈钗稽c(diǎn)，其目的是____________________________。

（3）PCR設(shè)計(jì)的引物序列一般介于20～30 bp，若引物序列太長帶來的影響主要是______________________________________。

（4）PCR擴(kuò)增時，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度的設(shè)定主要與________________有關(guān)。

（5）如果模板DNA完全正常，但PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，其原因可能為____________、____________。

【答案】下丘腦 總mRNA 逆轉(zhuǎn)錄 5′ 便于酶切后構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒） PCR特異性提高，但是引物與模板鏈的結(jié)合效率降低 引物長度、堿基組成 退火溫度太高 引物設(shè)計(jì)錯誤

【解析】

利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因：PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，原理：DNA雙鏈復(fù)制；過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈（變性）；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈（退火）；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成（延伸）；擴(kuò)增目的基因的前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。

（1）下丘腦分泌抗利尿激素，所以欲構(gòu)建抗利尿激素的cDNA文庫，應(yīng)從下丘腦中提取總mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄等過程獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。這里提取mRNA是無法選擇的，只能將所有mRNA均提取出來，在PCR時可以通過設(shè)計(jì)特異性的引物來達(dá)到PCR擴(kuò)增某基因的目的。

（2）PCR是基因工程的第一步，為了后續(xù)構(gòu)建基因表達(dá)載體，在設(shè)計(jì)一對與抗利尿激素基因兩端序列互補(bǔ)配對的引物時（引物1和引物2），一般在引物的5′端需要增加適當(dāng)?shù)南拗泼盖懈钗稽c(diǎn)。

（3）PCR設(shè)計(jì)的引物序列一般介于20～30bp，若引物序列太長帶來的影響主要是擴(kuò)增效率降低，而引物太短又容易導(dǎo)致異常DNA的產(chǎn)生。

（4）PCR擴(kuò)增時，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度的設(shè)定主要與引物長度和堿基組成中G-C比例呈正相關(guān)。

（5）如果退火溫度太高，引物無法與模版鏈結(jié)合，所以如果模板DNA完全正常，但PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，其原因可能為退火溫度太高或引物設(shè)計(jì)錯誤（無法與任何模板鏈結(jié)合，無法進(jìn)行DNA復(fù)制）

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】種羊的性別決定為XY型。已知其有角和無角由位于常染色體上的等位基因（N/n）控制；黑毛和白毛由等位基因（M/m）控制，且黑毛對白毛為顯性。回答下列問題：

（1）公羊中基因型為NN或Nn的表現(xiàn)為有角，nn無角；母羊中基因型為NN的表現(xiàn)為有角，nn或Nn無角。若多對雜合體公羊與雜合體母羊雜交，則理論上，子一代群體中母羊的表現(xiàn)型及其比例為_____；公羊的表現(xiàn)型及其比例為_________。

（2）某同學(xué)為了確定M/m是位于X染色體上，還是位于常染色體上，讓多對純合黑毛母羊與純合白毛公羊交配，子二代中黑毛∶白毛=3∶1，我們認(rèn)為根據(jù)這一實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，不能確定M/m是位于X染色體上，還是位于常染色體上，還需要補(bǔ)充數(shù)據(jù)，如統(tǒng)計(jì)子二代中白毛個體的性別比例，若________________________，則說明M/m是位于X染色體上；若________________________，則說明M/m是位于常染色體上。

（3）一般來說，對于性別決定為XY型的動物群體而言，當(dāng)一對等位基因（如A/a）位于常染色體上時，基因型有____種；當(dāng)其位于X染色體上時，基因型有____種；當(dāng)其位于X和Y染色體的同源區(qū)段時，（如圖所示），基因型有____種。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖1為某反射弧結(jié)構(gòu)的模式圖，其中①和②表示神經(jīng)元的相關(guān)結(jié)構(gòu)（甲、乙、丙、丁是神經(jīng)元上的4個位點(diǎn)），a、b是何結(jié)構(gòu)未知。圖2為神經(jīng)中樞某一結(jié)構(gòu)示意圖�；卮鹣铝袉栴}：

（1）圖2結(jié)構(gòu)的名稱是________；B所處的內(nèi)環(huán)境成分是_____________。

（2）興奮在圖2結(jié)構(gòu)處傳遞方向是________（用圖中字母和箭頭表示），原因是_________________。若C為某肌細(xì)胞的細(xì)胞膜，則B作用于C后引起的生理效應(yīng)是__________________________。

（3）現(xiàn)欲通過實(shí)驗(yàn)探究圖1中a或b為效應(yīng)器還是感受器。某小組同學(xué)以微電流計(jì)為實(shí)驗(yàn)儀器，以結(jié)構(gòu)乙和丙兩點(diǎn)的膜外側(cè)為微電流計(jì)兩個電極搭載的位點(diǎn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：刺激位點(diǎn)甲，若微電流計(jì)指針偏轉(zhuǎn)_______次，說明局部電流_____________（填“能”或“不能”）通過神經(jīng)中樞的突觸傳遞到②，則a為感受器，b為效應(yīng)器；刺激位點(diǎn)甲，若微電流計(jì)指針偏轉(zhuǎn)_____次，說明局部電流_________（填“能”或“不能”）通過神經(jīng)中樞的突觸傳遞到②，則a為效應(yīng)器，b為感受器。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如甲圖所示，在神經(jīng)纖維上安裝兩個完全相同的靈敏電表，表1兩電極分別在a、b處膜外，表2兩電極分別在d處膜的內(nèi)外側(cè)。在bd中點(diǎn)c給予適宜刺激，相關(guān)的電位變化曲線如乙圖、丙圖所示。據(jù)圖分析，下列說法正確的是

A. 表1記錄得到乙圖所示的雙向電位變化曲線

B. 乙圖①點(diǎn)時Na+的內(nèi)流速率比②點(diǎn)時更大

C. 乙圖曲線處于③點(diǎn)時，丙圖曲線正處于④點(diǎn)

D. 丙圖曲線處于⑤點(diǎn)時，甲圖a處電位表現(xiàn)為“外負(fù)內(nèi)正”

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】將原產(chǎn)某地的某種一年生植物甲，分別引種到低緯度和高緯度地區(qū)種植，很多年以后移植到原產(chǎn)地，開花時期如圖所示。請回答下列問題：

（1）將植物甲引種到低緯度與高緯度地區(qū)，這樣原屬于同一個物種的種群 a、b 和 c 之間形成___________，種群 b 和種群 c 個體之間由于花期不同，已不能正常受粉，說明已產(chǎn)生了_________。種群 b 和種群 c 是不是同一物種？___________。

（2）在對植物乙的某一種群進(jìn)行的調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)基因型為 DD 和 dd 的植株所占的比例分別為10%和 70%（各種基因型個體生存能力相同），第二年對同一種群進(jìn)行的調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)基因型為 DD 和 dd 的植株所占的比例分別為 4%和 64%，因此有同學(xué)說在這一年中，該植物種群所有性狀肯定都沒有發(fā)生進(jìn)化，該同學(xué)的說法對嗎？并說出你的理由：________________。

（3）現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為：種群是生物進(jìn)化的基本單位，自然選擇決定生物進(jìn)化的方向；________是新物種形成的三個基本環(huán)節(jié)；任何一個物種都不是單獨(dú)進(jìn)化的，而是_____的。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖表示葉綠體中色素吸收光能的情況。根據(jù)此圖并結(jié)合所學(xué)知識分析，以下說法中正確的是

①在晚間用大約550 nm波長的綠光照射行道樹，目的是通過植物光合作用以增加夜間空氣中的氧氣濃度

②據(jù)圖可知，用白光中450 nm左右波長的光比白光更有利于提高光合作用強(qiáng)度

③在經(jīng)過紙層析法分離出來的色素帶上，胡蘿卜素的印記在最上面

④土壤中缺乏鎂時，420～470 nm波長的光的利用量顯著減少，且鎂在老葉中的含量顯著減少

⑤由550 nm波長的光轉(zhuǎn)為670 nm波長的光后，葉綠體中C3的量減少

A.②④⑤B.③④⑤C.②③④D.①②⑤

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】科學(xué)家通過基因工程，將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入到普通棉株細(xì)胞內(nèi)，并成功實(shí)現(xiàn)了表達(dá)，從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株——抗蟲棉。其過程大致如圖所示：

（1）從蘇云金芽孢桿菌中獲取Bt毒蛋白基因，需要用到的工具是____________，可采用_________________技術(shù)對Bt毒蛋白基因進(jìn)行大量擴(kuò)增。

（2）基因表達(dá)載體的組成有Bt毒蛋白基因、啟動子、終止子以及___________等，啟動子是______________識別和結(jié)合的部位。

（3）用Ti質(zhì)粒作為載體，是因?yàn)?/span>Ti質(zhì)粒上有___________，它能將Bt毒蛋白基因整合到棉花細(xì)胞的_____________________________上。

（4）將Bt毒蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)采用的方法是________________。將基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，首先必須用_______________處理農(nóng)桿菌。

（5）檢測Bt毒蛋白基因在抗蟲棉中是否成功表達(dá)，在分子水平上的檢測方法是__________；要確定抗蟲棉是否具有抗蟲特性，還需要進(jìn)行______________水平的鑒定。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】圖1為植物葉肉細(xì)胞代謝的部分過程簡圖，①~⑦為相關(guān)生理過程，圖2表示在不同光照強(qiáng)度下該植物細(xì)胞的氧氣釋放速率。請據(jù)圖回答：

（1）圖1中過程④發(fā)生的場所為_______________，相關(guān)生理過程③~⑦中可發(fā)生在洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞中的為_______________，其中不能合成ATP的生理過程為_______________。

（2）圖2中影響a點(diǎn)的環(huán)境因素主要為_______________，若升高環(huán)境溫度則d點(diǎn)的變化為_______________（上移；下移；不動；無法確定）。在光照強(qiáng)度為1000lx的條件下，每天至少需要_______________h的光照，該植物才能正常生長。

（3）若將該植物放置于密閉容器中，通過儀器測定CO2的變化計(jì)算該植物1小時的實(shí)際光合作用強(qiáng)度，還需將該密閉容器放置在_______________。

（4）某學(xué)習(xí)小組要初步探究光照對該植物葉片中色素的種類及相對含量的影響，提取并采用_______________法分離色素，再進(jìn)行對照分析比較各組濾紙條上_______________得出結(jié)論。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】研究人員在對某生態(tài)系統(tǒng)研究后，繪制了該生態(tài)系統(tǒng)中的碳循環(huán)部分示意圖，圖1中甲、乙、丙、丁表示生態(tài)系統(tǒng)的相關(guān)成分，圖2表示該系統(tǒng)中部分生物間的食物關(guān)系。請據(jù)圖分析回答：

（1）圖1中缺少兩個重要過程，請用文字和箭頭的形式補(bǔ)充：______________________。

（2）圖2中，若鼠和昆蟲糞便中的能量為M，呼吸作用消耗的能量為R，用于自身生長、發(fā)育和繁殖等生命活動的能量為N，則圖中第二營養(yǎng)級的同化量可表示為__________。

（3）圖2中，若蛇的食物有2/3來自鼠，1/3來自蛙。從理論上講，蛇每增加1kJ能量，最多消耗植物____________kJ。

（4）某湖泊因大量排入污水，藻類過度繁殖，引起水草死亡，隨之大量浮游動物及魚類等死亡，水體發(fā)臭，水生生物的死亡又加重了水體污染，這種調(diào)節(jié)方式稱為___________調(diào)節(jié)。為保護(hù)湖泊生態(tài)系統(tǒng)的生物多樣性，我國已建立多個自然保護(hù)區(qū)，這屬于____________保護(hù)。

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