Question

人的血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重。如果應用基因工程和克隆技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。其大致過程如下：

　 Ⅰ.采集良種供體奶牛的卵母細胞和精液，通過體外受精，形成奶牛受精卵；

　 Ⅱ.將人血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵，形成重組細胞；

　 Ⅲ.電脈沖刺激重組細胞，促使其形成早期胚胎；

　 Ⅳ.將胚胎移植到受體母牛的子宮中，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

　 請回答下列問題：

　 (1)一般情況下，良種奶牛所產(chǎn)生的能用于體外受精的卵母細胞往往數(shù)量不足，請舉出一種可以獲得更多卵母細胞的方法：________________________________________________________________________。

　 (2)步驟Ⅰ中，在體外受精前，需要對奶牛的精子進行________處理。受精時，往往一個卵母細胞只能和一個精子結(jié)合，受精過程中防止多精入卵的生理反應包括________反應和卵黃膜封閉作用。

　 (3)步驟Ⅱ中，將人的血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵最為有效的方法是________。導入基因前，需要將血清白蛋白基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，這一步驟屬于基因工程“四步曲”中的__________________，此步驟的目的是____________________________________________，其中將血清白蛋白基因與調(diào)控組件結(jié)合時必須用到限制性核酸內(nèi)切酶和________酶。

　 (4)實驗步驟Ⅲ中，進行動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽和有機鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加________和動物血清。

　 (5)實驗步驟Ⅳ中，應選擇性別為________的奶牛胚胎進行移植。請舉出一種人工控制或篩選胚胎性別的方法：____________________�！�

　 (6)若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，現(xiàn)有兩種處理方法：

　 方法A：在步驟Ⅳ中將早期胚胎分離成若干個胚胎細胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛。進行上述操作時，應選擇發(fā)育至________階段的胚胎進行操作，分割時必須注意要將早期胚胎中的________均等分割。

　 方法B：在步驟Ⅳ中將早期胚胎細胞的細胞核移植到普通黃牛的________細胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎。為獲得大量可供移植的胚胎細胞核，可將早期胚胎細胞分離出來，在添加了抑制因子的培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的________細胞，再從該細胞中提取所需的細胞核。

　 上述兩種方法中，最能保持步驟Ⅳ中早期胚胎細胞遺傳特征的是方法________。

 

Answer 1

(1)①用促性腺激素處理良種母牛(使其超數(shù)排卵)；②從屠宰場已屠宰母牛的卵巢中采集、培養(yǎng)(答其中之一即可，其他合理答案也可)　(2)獲能　透明帶　(3)顯微注射法　基因表達載體的構(gòu)建　使人血清白蛋白基因能夠在奶牛乳腺細胞中穩(wěn)定存在，并可遺傳給下一代，同時能夠表達和發(fā)揮作用　DNA連接　(4)激素　(5)雌性　①X精子與Y精子分離技術(shù)(選擇X型精子進行體外受精；②顯微鏡鏡檢法(利用顯微鏡觀察胚胎細胞性染色體確定胚胎性別)；③SRY－PCR胚胎的性別鑒定技術(shù)[利用SRY基因(Y染色體上的性別決定基因)作為探針，對胚胎細胞的DNA進行檢測](答出一種即可)　(6)桑椹胚或囊胚　內(nèi)細胞團　去核卵母　胚胎干　A