【題目】徑柳匙葉草是一種泌鹽植物�？蒲泄ぷ髡邔搅兹~草液泡膜Na＋/K＋逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3A I、EcoR I、BamH I為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點(diǎn)；圖2是三種限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖；圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答問題：

（1）若圖1所示DNA片段是利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得的，則該獲取目的基因的方法為_________。

（2）不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA，其原因是_________。

（3）若用BamH I切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用_________切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達(dá)載體，該方案的缺陷是_________。故切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用_________酶。

（4）用上述最佳方案構(gòu)建基因表達(dá)載體，所得重組質(zhì)粒_________（選填“能”“不能”或“不一定能”）被BamHⅠ切割。

（5）圖3中，質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是_________。

（6）為了檢測(cè)技術(shù)成果，科研工作者在個(gè)體水平的檢測(cè)方法是_________。

【答案】從基因文庫中獲取 基因的選擇性表達(dá)（徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá)） Sau3A I 出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定 EcoRI和BamH I 不一定能 以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞 將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得目的基因的方法為從基因文庫中獲取目的基因。

（2）徑柳匙葉草根尖通過成熟區(qū)細(xì)胞吸收水分和礦質(zhì)元素，細(xì)胞中TaNHX2基因表達(dá),而分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá)。

（3）依據(jù)圖示限制酶識(shí)別和切割位點(diǎn)，用BamH I切取目的基因，不能選EcoR I切割載體，因?yàn)?/span>EcoR I切割產(chǎn)生的粘性末端和目的基因粘性末端堿基序列不相同。選用Sau3A I切割相應(yīng)質(zhì)粒，會(huì)產(chǎn)生相同的粘性末端，以便構(gòu)建基因表達(dá)載體，該方案的缺陷是出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定。為克服上述弊端，可選用EcoRI和BamH I切割質(zhì)粒。

（4）選用EcoRI和BamH I切割質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達(dá)載體后所得重組質(zhì)粒上不一定有BamHⅠ酶切位點(diǎn)，不一定能被BamH Ⅰ切割。

（5）基因工程中抗生素抗性基因常用作標(biāo)記基因，以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。

（6）結(jié)合目的基因的功能，人們通過將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況在個(gè)體水平檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】福壽螺已被我國列入外來入侵物種。如圖是防治福壽螺的稻鴨生態(tài)農(nóng)業(yè)模式，請(qǐng)回答下列問題：

（1）圖中有_____條食物鏈，其中福壽螺和鴨子之間的關(guān)系是_________。能將_____________壓制在一個(gè)低水平上。

（2）鴨子產(chǎn)生的糞便屬于___________同化量的一部分，糞便會(huì)被___________分解成無機(jī)物，為水稻等提供營養(yǎng)物質(zhì)。

（3）福壽螺作為人侵物種會(huì)導(dǎo)致生態(tài)系統(tǒng)的________能力下降，可利用鴨子防治福壽螺與稻飛虱，從能量流動(dòng)的角度看，其目的是_________________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】果蠅的灰體和黑體受等位基因 B， b 控制，截剛毛和正常剛毛受等位基因 D， d 控制，兩對(duì)基因獨(dú)立遺傳。為研究體色與剛毛性狀的遺傳，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答：

雜交組合

子代性別

子代表現(xiàn)型及數(shù)量

灰體正常剛毛

黑體正常剛毛

灰體截剛毛

黑體截剛毛

灰體正常剛毛雌性×黑體正常剛毛雄性

雌性

49

49

50

49

雄性

100

99

0

0

灰體截剛毛雌性×灰體正常剛毛雄性

雌性

0

0

151

49

雄性

149

50

0

0

（1）黑體是________性狀，控制剛毛性狀遺傳的基因_________（填位于常染色體或位于X 和 Y 染色體的同源區(qū)段或僅位于 X 染色體）上。組合二中的親本雄果蠅的基因型為_______________。

（2）截剛毛雄果蠅體細(xì)胞中最多有____個(gè)截剛毛基因。

（3）請(qǐng)寫出組合一親本雄果蠅與組合二親本雌果蠅雜交產(chǎn)生后代的遺傳圖解。___________________

（4）組合一中的 F1 果蠅群體中，d 的基因頻率是_________。讓組合一 F1 雌雄果蠅隨機(jī)交配，后代灰體正常剛毛雌果蠅的基因型有_________種，其中 BbXDXd 占的比例為_________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】圖為不同培養(yǎng)階段酵母菌種群數(shù)量、葡萄糖濃度和乙醇濃度的變化曲線，請(qǐng)回答下列問題：

(1) 曲線AB段酵母菌呼吸發(fā)生的場(chǎng)所是_____；曲線BC段酵母菌呼吸的方式為_________。

(2) 酵母菌種群數(shù)量從C點(diǎn)開始下降的主要原因除葡萄糖大量消耗外，還有_____、_____。

(3) 在T1一T2時(shí)段，單位時(shí)間內(nèi)酵母菌消耗葡萄糖量迅速增加的主要原因有________、___________。

(4) 某同學(xué)在T3時(shí)取樣，統(tǒng)計(jì)的酵母菌種群數(shù)量明顯高于D對(duì)應(yīng)的數(shù)量，原因可能有__________、____________和用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)出現(xiàn)錯(cuò)誤等。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】圖甲是用來測(cè)定某綠色植物相關(guān)生理過程的實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）若用該裝置來探究植物的細(xì)胞呼吸，則需要對(duì)裝置進(jìn)行________處理，處理后，若各種條件都一定且適宜，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)中紅墨水滴向左移動(dòng)，則表明植物__________，隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長，請(qǐng)預(yù)測(cè)紅色墨水滴的移動(dòng)狀態(tài)____________________。

（2）若用該裝置來探究溫度對(duì)植物光合作用的影響，除增加光照外，裝置還需要改動(dòng)的是_________；圖乙是用改動(dòng)后的裝置在適宜光照條件下測(cè)得的溫度與光合作用速率和呼吸作用速率的變化關(guān)系曲線，由圖可知：

①光合作用和呼吸作用都受溫度的影響，其中最適合植物生長的溫度是_____；在溫度為 40℃的條件下，植物的實(shí)際光合速率為___。

②在溫度為 55℃條件下，植物細(xì)胞呼吸消耗的氧氣來源是_______。

③若溫度保持在 20℃的條件下，長時(shí)間每天交替進(jìn)行 14h 光照、10h 黑暗，植物能否正常生長？_____（填“能”或“不能”）。

④為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，本實(shí)驗(yàn)還需設(shè)置對(duì)照組，對(duì)照組設(shè)置情況是________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】果蠅卷翅基因 A 是 2 號(hào)染色體（常染色體）上的一個(gè)顯性突變基因，其等位基因 a 控制野生型翅型，卷翅基因 A 純合時(shí)致死。

（1）研究者發(fā)現(xiàn) 2 號(hào)染色體上的另一純合致死基因 B，從而得到“平衡致死系”果蠅，其基因與染色體關(guān)系如圖。圖中同源染色體上的 2個(gè)DNA分子堿基序列是否相同？______該品系的雌雄果蠅互交（不考慮交叉互換和基因突變），其子代中雜合子的概率是______；子代與親代相比，子代 A 基因的頻率______（上升/下降/不變）。

（2）欲利用 “平衡致死系”果蠅來檢測(cè)野生型果蠅的一條 2 號(hào)染色體上是否出現(xiàn)決定新性狀的隱性突變基因，DD 和 Dd 不影響翅型，dd 決定新性狀翅型�？勺鱿铝须s交實(shí)驗(yàn)（不考慮雜交過程中的交叉互換及新的基因突變）：

實(shí)驗(yàn)步驟：P“平衡致死系”果蠅（♀）×待檢野生型果蠅（♂）

F1 選出卷翅的雌雄果蠅隨機(jī)交配

F2 ？

預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果并得出結(jié)論：

F2 代的表現(xiàn)型及比例為_____________________，說明待檢野生型果蠅的 2 號(hào)染色體上有決定新性狀的隱性突變基因。

F2 代的表現(xiàn)型及比例為_______________________，說明待檢野生型果蠅的 2 號(hào)染色體上沒有決定新性狀的隱性突變基因。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列實(shí)驗(yàn)程序不正確的是（ ）

A.蔬菜加工+泡菜鹽水→加調(diào)料、裝壇泡菜

B.挑選葡萄、沖洗、榨汁果醋果酒

C.動(dòng)物組織制備細(xì)胞懸液→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)

D.離體細(xì)胞消毒、接種愈傷組織試管苗

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖是某細(xì)胞在某項(xiàng)生命活動(dòng)的前后，幾種生物膜面積的變化圖。該過程中不可能合成的下列物質(zhì)是（ ）

A.抗體

B.性激素

C.抗原-MHC復(fù)合體

D.胰蛋白酶

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】Bt基因即蘇云金芽孢桿菌（Badcilusthuringiensis）基因，其表達(dá)產(chǎn)物伴胞晶體是一種毒性很強(qiáng)的蛋白質(zhì)晶體，能使一些鱗翅目害蟲癱瘓致死。如圖為培養(yǎng)轉(zhuǎn)Bt基因試管苗的基本操作過程。

（1）Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫中獲取，也可以從其cDNA文庫中獲取，后者獲取的基因與前者的區(qū)別是______（填“含有”或“不含有”）啟動(dòng)子。若目的基因滿足______條件時(shí)，也可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。

（2）圖中用到Ti質(zhì)粒作為載體將Bt基因送入受體細(xì)胞中，質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，其作用是______�；虮磉_(dá)載體的組成包括__________________________。

（3）步驟Ⅳ中產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)稱為______，步驟Ⅳ和Ⅴ過程要注意控制培養(yǎng)基中______的濃度比例，以便獲得幼苗。

（4）生態(tài)工程是實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)的最重要手段之一，所謂循環(huán)經(jīng)濟(jì)，是使一個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物，能夠成為本系統(tǒng)或者另一個(gè)系統(tǒng)的生產(chǎn)原料，從而實(shí)現(xiàn)______。我國西北的一些地區(qū)年降雨量很小，只適宜種植少數(shù)的草本植物，但卻被硬性規(guī)定種植轉(zhuǎn)Bt基因的植物，結(jié)果造成減產(chǎn)。這個(gè)案例主要違背了生態(tài)工程的______原理。

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