Question

【題目】科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達，但在進行基因工程的操作過程中，需要同特點的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選，已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是﹣G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是﹣G↓GATC﹣，請據(jù)圖回答：

（1）過程①表示的是采取的方法來獲取目的基因．
（2）根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達載體過程中，應(yīng)用限制酶切割質(zhì)粒，用限制酶切割目的基因．用限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端通過原則進行連接．
（3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組，原因是 ．
（4）人體的生長激素基因能在細菌體內(nèi)成功表達是因為 ． 寫出目的基因在細菌中表達的過程 ．
（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，（填能或不能）說明一定導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，因為 ．

Answer 1

【答案】
（1）反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）
（2）Ⅰ；Ⅱ；堿基互補配對
（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同
（4）共用一套（遺傳）密碼子；
（5）不能；如果導(dǎo)入普通質(zhì)粒也能在含有安芐青霉素的培養(yǎng)基上生長
【解析】解：（1）過程①是以mRNA為模板形成基因的過程，屬于反轉(zhuǎn)錄，此過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與．（2）在構(gòu)建基因表達載體時，需用限制酶對目的基因和質(zhì)粒進行切割以形成相同的黏性末端．質(zhì)粒如果用限制酶Ⅱ來切割的話，將會在質(zhì)粒在出現(xiàn)兩個切口且抗生素抗性基因全被破壞，故質(zhì)粒只能用限制酶Ⅰ切割（破壞四環(huán)素抗性而保留氨芐青霉素抗性，即將來形成的重組質(zhì)粒能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存）；目的基因兩端都出現(xiàn)黏性末端時才能和質(zhì)粒發(fā)生重組，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割時，才會在兩端都出現(xiàn)黏性末端．黏性末端其實是被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，這個切口上帶有幾個伸出的核苷酸，它們之間正好通過堿基互補配對進行連接．（3）來源不同的DNA之所以能發(fā)生重新組合，主要原因是兩者的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)相同，都是雙螺旋結(jié)構(gòu)，基本組成單位都是脫氧核苷酸等．（4）所有的生物都共用一套密碼子，所以人體的生長激素基因能在細菌體內(nèi)成功表達，過程是生長激素基因→mRNA→生長激素．（5）因本題上有2個標記基因，但抗四環(huán)素基因被插入的目的基因破壞掉，因此剩下的是抗氨芐青霉素抗性基因，如果在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長，說明已經(jīng)導(dǎo)入了重組質(zhì)粒或普通質(zhì)粒A，因為普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
所以答案是：（1）反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）（2）Ⅰ；Ⅱ；堿基互補配對（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同（4）共用一套（遺傳）密碼子； （5）不能；如果導(dǎo)入普通質(zhì)粒也能在含有安芐青霉素的培養(yǎng)基上生長
【考點精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．