Question

【題目】促紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO），生產(chǎn)流程如圖，請回答下列問題：

（1）圖中①所指的技術(shù)中，需要在進行過程中補充的物質(zhì)是_______。圖中②所指的物質(zhì)是____，檢測細(xì)胞能否表達(dá)出③的方法是_______技術(shù)。

（2）受體細(xì)胞選擇倉鼠卵巢細(xì)胞系，主要是基于這種細(xì)胞的________特性。培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時，除適宜的溫度及無菌條件外，還需要保證的環(huán)境因素是________________，為防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)____。

（3）科學(xué)家經(jīng)過努力現(xiàn)已研制出了可以口服的EPO，為培育出乳汁中含有此類EPO的轉(zhuǎn)基因牛，需選擇__________作為受體細(xì)胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技術(shù)主要有______________（要求填兩項）。

Answer 1

【答案】 原料和引物 mRNA 抗原——抗體雜交 可無限增殖 氣體條件（5%CO2濃度） 定時更換培養(yǎng)液（定期換瓶） 受精卵 體外受精、體外胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割

【解析】試題分析：據(jù)圖分析可知：①和②過程都是獲取目的基因的途徑，①是利用PCR技術(shù)短時間內(nèi)擴增目的基因，②是通過反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因，獲得此圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人工紅細(xì)胞生成素（rhEPO）期間要生產(chǎn)流程，最終產(chǎn)物是紅細(xì)胞生成素（rhEPO），由此可推測出圖中高效表達(dá)出③的重組CHO細(xì)胞是高效表達(dá)出紅細(xì)胞生成素（rhEPO）的重組細(xì)胞。

（1）由圖可知：①過程是PCR擴增目的基因技術(shù)，在生物體外復(fù)制，需要在復(fù)制過程中補充的脫氧核苷酸原料和2種引物。圖中②為逆轉(zhuǎn)錄過程，模板是mRNA，③為紅細(xì)胞生成素，屬于蛋白質(zhì)，因此可以用抗原——抗體雜交技術(shù)來檢測。

（2）倉鼠卵巢細(xì)胞系能無限增殖，因此選擇該細(xì)胞作為受體細(xì)胞，動物細(xì)胞要在95%空氣加5%CO2的混合氣體中培養(yǎng)，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)過程中，營養(yǎng)物質(zhì)逐漸被消耗，逐漸產(chǎn)生代謝廢物和PH降低等等因素都會使細(xì)胞受到傷害，因此需要定期更換培養(yǎng)液。

（3）培養(yǎng)EPO的轉(zhuǎn)基因牛，需選擇受精卵作為受體細(xì)胞，因為受精卵全能性比較高。轉(zhuǎn)基因牛的產(chǎn)生是有性生殖的一種，要經(jīng)過體外受精、胚胎的早期培養(yǎng)、胚胎移植和胚胎分割等技術(shù)。