2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白(GFP)會(huì)發(fā)出綠色熒光,可借助熒光跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程:
                      ①          ②          ③         ④         ⑤
請(qǐng)根據(jù)上述材料回答下列問(wèn)題:
(1)上述流程中,作為目的基因的是________。
(2)在培育綠色熒光小鼠的工程中,基因表達(dá)載體的構(gòu)建是核心。一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因、啟動(dòng)子、____基因等部分。
(3)過(guò)程①用到的工具酶有________________ ,過(guò)程②采用的方法是____________,過(guò)程④利用的生物技術(shù)是_________。
(4)為迅速增加綠色熒光小鼠的數(shù)量,可采用試管動(dòng)物技術(shù)。在這項(xiàng)技術(shù)中,首先要做的是體外受精和____________。哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括____________、精子的獲取和受精等幾個(gè)主要步驟。
(5)為提高胚胎的利用率,可采用________技術(shù),應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的________或囊胚進(jìn)行分割。在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將________進(jìn)行均等分割。

(1)GFP基因;(2)標(biāo)記;(3)限制酶和DNA連接酶;顯微注射技術(shù);胚胎移植;
(4)早期胚胎的培養(yǎng);卵母細(xì)胞的采集;(5)胚胎分割;桑椹胚;內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

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2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白”的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因,再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi),表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是

A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程

B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C. 追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布

D.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)

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A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程

B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布

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2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖,據(jù)圖回答:

(1)圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒,需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—GGATCC—,限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn),在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
①請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA連接酶的作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是否可以連接起來(lái),        理由是:               
(2)過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí),采用最多也最有效的方法是______。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上,GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因,其作用是                 。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬,可以解決的醫(yī)學(xué)難題是,可以避免                

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