Question

蛋白質(zhì)分子中，氨基酸的α－氨基和α－羧基雖然大部分都能結(jié)合形成肽鍵，但是蛋白質(zhì)分子內(nèi)仍含有各種酸性基團和堿性基團，如肽鏈末端的α－氨基和α－羧基、天冬氨酸和谷氨酸殘基中的羧基、賴氨酸和組氨酸殘基中的各種堿性基團，所以蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。在酸性溶液中，堿性基團的解離程度增大，使蛋白質(zhì)帶正電荷；在堿性溶液中，酸性基團的解離程度加強，使蛋白質(zhì)帶負電荷。當(dāng)溶液到達某一pH時，蛋白質(zhì)可因內(nèi)部酸性或堿性基團的解離程度相等而呈等電狀態(tài)，這時溶液的pH叫做蛋白質(zhì)的等電點。不處于等電點狀態(tài)的蛋白質(zhì)分子的正、負電荷量是不相同的。試回答下列問題。

(1)多數(shù)蛋白質(zhì)的等電點近于5，一般含堿性基團較多的蛋白質(zhì)的等電點________(“偏高”還是“偏低”)。

(2)根據(jù)等電點的不同，你能用________方法將不同種類的蛋白質(zhì)分子分開。

(3)簡述根據(jù)等電點分離不同種類的蛋白質(zhì)分子的原理。

 

Answer 1

(1)偏高　(2)電泳　(3)調(diào)節(jié)電泳槽中緩沖液的pH，使某種蛋白質(zhì)處于等電點狀態(tài)，而其他蛋白質(zhì)帶有電荷，在電場作用下，帶有正、負電荷的蛋白質(zhì)分別移向兩極，而不帶電荷的蛋白質(zhì)留在原處。

本題深入到蛋白質(zhì)內(nèi)部，從蛋白質(zhì)分子帶電性質(zhì)及數(shù)量的深度引導(dǎo)學(xué)生理解電泳法分離蛋白質(zhì)的原理。含堿性基團較多的蛋白質(zhì)溶液，在pH近于5時解離程度較大，蛋白質(zhì)帶正電荷。要使蛋白質(zhì)內(nèi)部酸性和堿性基團解離程度相等呈等電狀態(tài)，必須提高溶液的pH，使酸性基團解離程度增大，故蛋白質(zhì)的等電點提高。根據(jù)等電點不同，可以利用電泳法將特定的蛋白質(zhì)分離出來。