Question

【題目】為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖甲)，擬將其與質(zhì)粒(圖乙)重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。

下列操作與實驗?zāi)康牟环�的�?/span> (　　)

A.用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒

B.用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入�?xì)胞

C.在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞

D.用分子雜交方法檢測C基因是否整合到菊花染色體上

Answer 1

【答案】C

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

A、目的基因C和質(zhì)粒都有可被EcoR Ⅰ切割的酶切位點，另外需要DNA連接酶將切好的目的基因和質(zhì)粒連接起來，A項正確；

B、愈傷組織全能性較高，是理想的植物受體細(xì)胞，將目的基因?qū)�入植物受體細(xì)胞的方法通常為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，B項正確；

C、質(zhì)粒中含有潮霉素抗性基因，因此選擇培養(yǎng)基中應(yīng)該加入潮霉素，C項錯誤；

D、使用分子雜交方法可檢測目的基因是否整合到受體染色體上，D項正確。

故選C。