Question

【題目】MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切點(diǎn)。圖3表示利用基因工程生產(chǎn)胰島素的三種途徑。圖4表示改造哺乳動(dòng)物遺傳特性的三種途徑。請(qǐng)據(jù)圖回答問題。

（1）若要用如圖1和圖2中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行改造，構(gòu)建新的限制酶切位點(diǎn)。在構(gòu)建新的限制酶切位點(diǎn)的過程中需要使用哪些工具酶___________________。

（2）圖3中催化過程①的DNA連接酶的作用是促使形成_________________，導(dǎo)入受體細(xì)胞B常用方法_______________，④過程也可以培養(yǎng)到______________，再從培養(yǎng)液中提取。導(dǎo)入受體細(xì)胞C首先使用Ca2+處理使其吸收周圍的DNA分子，之后將細(xì)胞C與圖中M溶于_____________________中，完成轉(zhuǎn)化過程。

（3）獲得動(dòng)物1的受體細(xì)胞通常是受精卵，哺乳動(dòng)物卵原細(xì)胞減數(shù)分裂形成成熟卵子的過程中，注射促性腺激素后還需_______________的誘導(dǎo)下才能完成。動(dòng)物2體內(nèi)各體細(xì)胞的基因種類________________。上述動(dòng)物的獲得均需運(yùn)用_________________________技術(shù)。

（4）干細(xì)胞科技發(fā)展至今，已進(jìn)入以臍帶、胎盤等組織為主要干細(xì)胞來源的全新時(shí)代。目前國內(nèi)干細(xì)胞臨床研究超過半數(shù)采用臍帶或胎盤干細(xì)胞。胎盤干細(xì)胞由囊胚的________________細(xì)胞發(fā)育而來，利用胎盤干細(xì)胞具有發(fā)育全能性的特點(diǎn)，所以臨床上可以用于__________________，從而挽救器官衰竭的患者的生命。

Answer 1

【答案】限制酶EcoRⅠ、DNA聚合酶、DNA連接酶 磷酸二酯鍵 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 愈傷組織 緩沖液 精子 不相同 胚胎移植 滋養(yǎng)層 器官移植

【解析】

分析題圖：圖1質(zhì)粒中含有限制酶PstⅠ和EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，圖2含目的基因的外源DNA中含有限制酶PstⅠ、MseⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，其中EcoRⅠ酶的切割位點(diǎn)位于目的基因中。

（1）質(zhì)粒只有EcoR I酶和Pst I酶的識(shí)別位點(diǎn)，外源DNA分子含有Mse I酶、EcoR I酶和Pst I酶識(shí)別位點(diǎn)，且切割獲得目的基因需要Mse I酶和Pst I酶，對(duì)質(zhì)粒改造使，需構(gòu)建新的限制酶酶切位點(diǎn)；首先用EcoRⅠ處理質(zhì)粒；然后用DNA聚合酶處理質(zhì)粒，使被切開的質(zhì)粒末端連接上相應(yīng)的脫氧核苷酸；再用DNA連接酶處理質(zhì)粒，形成了的限制酶酶切割位點(diǎn)，這樣它可被MetⅠ識(shí)別。

（2）催化過程①的DNA連接酶的作用是促使磷酸二酯鍵的形成；將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞B（植物細(xì)胞）的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；④過程也可以培養(yǎng)到愈傷組織后再從培養(yǎng)液中提取產(chǎn)物；導(dǎo)入受體細(xì)胞C）需要用Ca2+處理使大腸桿菌處于感受態(tài)，之后將細(xì)胞C與圖中M溶于緩沖液中，完成轉(zhuǎn)化過程。

（3）使成熟卵子形成的過程是在受精過程中完成的，因此細(xì)胞只有在精子的作用下才能形成成熟卵子；動(dòng)物2是由注入體細(xì)胞（含目的基因）的囊胚發(fā)育而來的，該動(dòng)物含有目的基因的體細(xì)胞與其他體細(xì)胞的基因種類不同；上述動(dòng)物的獲得均需運(yùn)用胚胎移植技術(shù)。

（4）胎盤干細(xì)胞可來源于囊胚的滋養(yǎng)層；由于胎盤干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，所以臨床上可以用于器官移植，從而挽救器官衰竭的患者的生命。