Question

【題目】下圖是克隆羊的培育流程圖，根據(jù)所學知識回答下列問題。

（1）培育克隆羊時用到的卵母細胞可以從屠宰場收集，并在體外培養(yǎng)到___________期。

（2）從供體羊中取上皮細胞，用 處理，然后進行分散培養(yǎng)。整個過程必須保證細胞處于

的環(huán)境中，所需營養(yǎng)物質(zhì)要與體內(nèi)基本相同。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或者松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含 的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（3）通過 法吸出卵母細胞中的細胞核，微型吸管除了將細胞核吸除外，往往還會將

一并吸出。

（4）去核的卵母細胞與供體細胞通過 后融合，供體核進入受體卵母細胞，構(gòu)建成重組胚胎，

融合后的重組胚胎，需要用物理或化學的方法進行激活，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。

（5）用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，因為 。

（6）將重組胚胎發(fā)育到一定階段，移植到同種的且 相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育，最后形成克隆羊。移入的胚胎能夠存活，是因為代孕子宮并不會對其發(fā)生 ，同時能夠與受體子宮建立正常的 聯(lián)系。

（7）欲培養(yǎng)高產(chǎn)奶山羊這一優(yōu)良品種，對移植前的胚胎進行性別鑒定時，宜取囊胚期的 細胞進行鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn) （填“陽”或者“陰”）性反應(yīng)的雌性胚胎進行移植。

Answer 1

【答案】（1）減數(shù)第二次分裂中期

（2）胰蛋白酶 無菌、無毒 95%空氣加5%CO2

（3）顯微操作 第一極體

（4）電擊

（5）10代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細胞核移植中，為保證供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細胞

（6）生理狀態(tài) 免疫排斥反應(yīng) 生理和組織聯(lián)系

（7）滋養(yǎng)層細胞 陰性

【解析】（1）培育克隆羊時用到的卵母細胞可以從屠宰場收集，并在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期

（2）從供體羊中取上皮細胞，用胰蛋白酶處理，然后進行分散培養(yǎng)。整個過程必須保證細胞處于無菌、無毒的環(huán)境中，進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或者松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，其中95%空氣是細胞代謝必需的，5%的CO2維持培養(yǎng)液的PH值

（3）通過顯微操作法吸出卵母細胞中的細胞核，微型吸管除了將細胞核吸除外，往往還會將第一極體一并吸出。

（4）去核的卵母細胞與供體細胞通過電擊后融合，供體核進入受體卵母細胞，構(gòu)建成重組胚胎，

（5）用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，因為10代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細胞核移植中，為保證供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細胞

（6）將重組胚胎發(fā)育到一定階段，移植到同種的且生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育，最后形成克隆羊。移入的胚胎能夠存活，是因為代孕子宮并不會對其發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，同時能夠與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系。

（7）欲培養(yǎng)高產(chǎn)奶山羊這一優(yōu)良品種，對移植前的胚胎進行性別鑒定時，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn)陰性反應(yīng)的雌性胚胎進行移植。