目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因,以便于                    

(2)pBR32Z分子中有單個EcoRI限制酶作用位點,EcoR 1只能識別序列一GAATTC一,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRI的切點,請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端。                    。

(3)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點,現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù)          鍵,成功的獲得了重組質(zhì)粒。說明                                      。

(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是                 ,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是                  。

 (1)篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細胞)

  (2)(2分)

  (3)磷酸二酯鍵兩種限制酶(BamHⅠ和Bg1Ⅱ)切割得到的黏性末端相同

  (4)能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素pBR322質(zhì)粒

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目:高中生物 來源: 題型:

目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)建構(gòu)基因表達載體時,必須有               、復(fù)制原點、目的基因、終止子以及                                    。

(2)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因,以便于                    。

(3)pBR322分子中有單個EcoRI限制酶作用位點,EcoRl只能識別序列—GAATTC一,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRl的切點,請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端                   。

(4)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點,現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù)         ,成功獲得了重組質(zhì)粒。說明                         。

(5)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是            。圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是                 。

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科目:高中生物 來源:2012屆山西省太原五中高三上學期9月份月考生物試卷 題型:綜合題

(11分)目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因,以便于________。觀察上圖,如果A為質(zhì)粒,則C表示       
(2)pBR322分子中有單個EcoRⅠ限制酶作用位點,EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRⅠ的切點,請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
_______________________________________________________________________
(3)pBR322分子中另有單個的BamHⅠ限制酶作用位點,現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因,通過____________作用恢復(fù)________________________鍵,成功地獲得了重組質(zhì)粒。能形成重組質(zhì)粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作為受體大腸桿菌應(yīng)不含_______________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是_______,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是______________。
(5)基因工程中使用的限制酶,其特點是_______________________,下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。

將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X-1混合連接,連接后獲得的質(zhì)粒類型有___。(可多選)

A.X-1B.X-2C.X-3D.X-4

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科目:高中生物 來源:2011-2012學年山西省高三上學期9月份月考生物試卷 題型:綜合題

(11分)目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因,以便于________。觀察上圖,如果A為質(zhì)粒,則C表示        。

(2)pBR322分子中有單個EcoRⅠ限制酶作用位點,EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRⅠ的切點,請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。

_______________________________________________________________________

(3)pBR322分子中另有單個的BamHⅠ限制酶作用位點,現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因,通過____________作用恢復(fù)________________________鍵,成功地獲得了重組質(zhì)粒。能形成重組質(zhì)粒的原因是_______________________________________________________________________

 (4) 作為受體大腸桿菌應(yīng)不含_______________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是_______,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是______________。

(5)基因工程中使用的限制酶,其特點是_______________________,下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。

 

將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X-1混合連接,連接后獲得的質(zhì)粒類型有___。(可多選)A.X-1  B.X-2   C.X-3   D.X-4

 

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科目:高中生物 來源: 題型:

目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因,以便于________。

(2)pBR322分子中有單個EcoRⅠ限制酶作用位點,EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRⅠ的切點,請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。

(3)pBR322分子中另有單個的BamHⅠ限制酶作用位點,現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù)________鍵,成功地獲得了重組質(zhì)粒。說明____________________________________________________。

(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampRtetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是____________,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是________________。

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