Question

【題目】鐮刀形細胞貧血癥是一種單基因遺傳病，是由正常的血紅蛋白基因（HbA)突變?yōu)殓牭缎渭毎�貧血癥基因（Hbs)引起的。在非洲地區(qū)黑人中有4%的人是該病患者，會在成年之前死亡，有32%的人是攜帶者，不發(fā)病但血液中有部分紅細胞是鐮刀形。

（1）某表現型正常的非洲裔夫婦，若他們的孩子已經出生，檢查孩子是否患病的方法是___________；若孩子尚未出生，可以來用從羊水中收集少量胎兒的細胞，提取出DNA，用___________技術進行復制，然后通過___________的方法確認胎兒是否正常。

（2）上圖甲是正常人和患者血紅蛋白基因的部分片段，若用Mst II限制酶切割下圖中正常紅細胞基因片段，則會出現_____________個相同的黏性末端。

（3）若用Mst II限制酶切割胎兒DMA后，用凝膠電泳分離酶切片段，片段越大，在凝膠帶上距離加樣孔越近。加熱使酶切片段解旋后，用焚光標記的CFGACTCCT序列與其雜交，熒光出現的位置可能有下圖乙所示的三種結果。若出現_____________結果，則說明胎兒患��；若出現_________結果，則說明胎兒是攜帶者。

Answer 1

【答案】顯微鏡下觀察紅細胞形態(tài) PCR 基因診斷（DNA分子雜交） 6 B C

【解析】

圖甲為正常人和患者血紅蛋白基因的部分片段，可見鐮刀形細胞貧血癥是堿基對發(fā)生替換導致的，堿基發(fā)生改變后，中間位置的MstⅡ限制酶切割位點消失，即致病基因中不存在M stlⅡ限制酶切割位點。

圖乙中，用熒光標記的CTGACTCCT序列與其雜交，A中的DNA條帶較輕，并且只有一種類型的條帶，因此可以確定為正常血紅蛋白基因被切割形成的左側片段，即只含有顯性基因；B中的DNA條帶較重，并且只有一種類型，因此可以確定為鐮刀形細胞貧血癥基因的一條鏈與熒光標記的序列進行了雜交，即只含有致病基因；則C中同時具有正�；�因和致病基因，為該病致病基因的攜帶者。

（1）若孩子已出生，可在光學顯微鏡下觀察紅細胞形態(tài)，即可診斷其是否患病。若孩子尚未出生，則可從羊水中收集少量胎兒的細胞，提取出DNA，利用PCR技術大量復制，然后進行基因診斷。

（2）分析圖解可知，正常紅細胞基因片段上有3個該酶的切割位點，若用Mstll限制酶切割圖中正常紅細胞基因片段，則會出現3×2=6個相同的黏性末端。

（3）由于基因突變后酶切位點的丟失，使酶切片段長，根據題意片段越大，在凝膠上離加樣孔越近，可知B為胎兒患病，C中出現兩條雜交帶所以為攜帶者。