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科目:高中生物 來源:上海市十三校2012屆高三第二次聯(lián)考生物試題 題型:071
回答下列關(guān)于基因工程的相關(guān)問題。
質(zhì)粒是基因工程中的一種常用的工具之一,經(jīng)修飾改造后的質(zhì)粒如下圖七一1所示。PUC118上的Lacz基因編碼β半乳糖苷酶的一條多肽鏈,其表達(dá)產(chǎn)物與菌落顏色有關(guān);經(jīng)“修飾”后的“多克隆位點(diǎn)”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。
1.PUC118上的基因AmpR作用的是:________“多克隆位點(diǎn)”中含有多種限制酶的識(shí)別序列,如HindⅢ,其切割后產(chǎn)生的DNA片斷中含有的部分序列是,則限制酶HindⅢ的識(shí)別序列是________。
2.圖2示意將目的基因?qū)氪竽c桿菌的操作步驟。其中,I~V表示操作過程;A-F表示使用的相關(guān)工其,其中的E1和E2表示有關(guān)的酶。試問:E2應(yīng)是________(酶);經(jīng)過E2的切割,供體染色體中的DNA片段中游離的磷酸基團(tuán)總數(shù)的變化是:________。
在策略上,圖1中的“多克隆位點(diǎn)”包含了多種、多個(gè)識(shí)別序列,請說出設(shè)計(jì)這種“多克隆位點(diǎn)”的目的:________。
3.LacZ基因可以使細(xì)菌在含有X-gttl(5-溴-4-氯-3-吲哚-B-D-半乳糖)底物和IPTG(一種乳糖類似物)的培養(yǎng)基上形成藍(lán)色的菌落,即X-gal被lacZ基因編碼產(chǎn)生的鼻半乳糖昔酶水解成藍(lán)色;若要形成重組質(zhì)粒,則在含X-gal的培養(yǎng)基上將形成白色菌落(而不是藍(lán)色的)。
請據(jù)圖2分析下列問題:
①用本無PUC118的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶C中被連接處理后的DNA混合物傾入含X-gal、IPTG和________的D培養(yǎng)基平板上,其目的是________。
菌落生長結(jié)果圖2中所示。
②過程V進(jìn)行轉(zhuǎn)移培養(yǎng),則該應(yīng)該挑選X、Y、Z中的________菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)。形成該顏色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了!
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