【題目】幽門螺旋菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下:

請(qǐng)回答:

(1)在涂布平板時(shí),取少量菌液滴加到培養(yǎng)基表面的原因是____________________________

(2)在配制培養(yǎng)基時(shí),要加入_______________指示劑,這是因?yàn)镠p含有脲酶,它能以尿素為氮源;若有Hp,則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)______色環(huán)帶。

(3)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp,其基本原理是________________________

(4)上述(3)中的指示劑出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的顏色是因?yàn)?/span>____________________________。

【答案】若涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量過(guò)多,則會(huì)導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果尿素酚紅紅Hp能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH314CO2氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高

【解析】

解答本題需掌握:1、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞。微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有4類,分別是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源及氮源。2、由于細(xì)菌在分解尿素的過(guò)程中合成脲酶,脲酶將尿素分解成氨,會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng),pH升高,所以可以用檢測(cè)pH的變化的方法來(lái)判斷尿素是否被分解,可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,尿素被分解后產(chǎn)生氨,pH升高,指示劑變紅。

(1)在涂布平板時(shí),若滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量過(guò)多,則會(huì)導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果,因此只需要取少量菌液滴加到培養(yǎng)基表面。

(2)根據(jù)題意,Hp含有脲酶,它能以尿素為氮源,因此在配制培養(yǎng)基時(shí),要加入尿素為唯一氮源;細(xì)菌Hp能將尿素分解形成氨氣,氨氣會(huì)時(shí)培養(yǎng)基pH值升高,使酚紅指示劑變紅,因此培養(yǎng)基中還應(yīng)加入酚紅指示劑;若有Hp,則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。

(3)由于Hp能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH314CO2,故臨床上可用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp。

(4)細(xì)菌Hp能將尿素分解形成氨氣,氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,使酚紅指示劑變紅。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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(3)過(guò)程④所用的酶是___________________________

(4)若用限制酶PstⅠ切割,完成過(guò)程④、⑤后,將三角瓶?jī)?nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上,再將甲培養(yǎng)基上的單個(gè)大腸桿菌接種到丙培養(yǎng)基上,待形成12個(gè)菌落后,將相應(yīng)菌落的一部分轉(zhuǎn)接到乙培養(yǎng)基的相同位置上。一段時(shí)間后,菌落的生長(zhǎng)狀況如圖乙、丙所示。接種到培養(yǎng)基乙上能存活的是導(dǎo)入含__質(zhì)粒的大腸桿菌。生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的工程菌應(yīng)從丙培養(yǎng)基的菌落中選取,選取的依據(jù)是______。

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