Question

【題目】圖1表示抗體的基本結(jié)構(gòu)，VL是輕鏈可變區(qū)，VH是重鏈可變區(qū)。不同抗體可變區(qū)不同。雜交瘤技術(shù)的出現(xiàn)使抗體的制備進(jìn)入了單克隆時(shí)代，而20世紀(jì)90年代發(fā)明的噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)為單抗的制備開(kāi)辟了全新領(lǐng)域。圖2表示人源性噬菌體抗體生產(chǎn)過(guò)程流程圖。

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）運(yùn)用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體，用特定的選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞后，再經(jīng)過(guò)_________和__________，目的是篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。與常規(guī)的血清抗體相比，單克隆抗體最大的優(yōu)越性是___________________。

（2）在免疫過(guò)程中，需要向健康人體注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重復(fù)注射一次，重復(fù)注射的目的是______________________________________。

（3）過(guò)程①使用了RT-PCR技術(shù)，與常規(guī)PCR技術(shù)相比較，RT一PCR增加了_____過(guò)程。

（4）從人源性噬菌體抗體生產(chǎn)過(guò)程分析，含抗體基因片段最終需要整合到_________中。

Answer 1

【答案】克隆化培養(yǎng) 抗體檢測(cè) 特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備 加強(qiáng)免疫，增加體內(nèi)特定漿細(xì)胞的數(shù)量 逆轉(zhuǎn)錄 噬菌體DNA

【解析】

1、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體；人工免疫時(shí)需要定期注射抗原，其目的是加強(qiáng)免疫，使機(jī)體產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞。

2、圖2過(guò)程①先是以mRNA為模板合成DNA，然后再利用PCR使其擴(kuò)增；在PCR中需要加入特定的引物；將目的基因?qū)�入大腸桿菌時(shí)，需要先用鈣離子處理大腸桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞。噬菌體在侵染細(xì)菌時(shí)，是其遺傳物質(zhì)DNA進(jìn)入大腸桿菌體內(nèi)，因此需要將含抗體基因片段整合到噬菌體DNA中。

（1）用特定的選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞后，需要再經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，目的是篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。與常規(guī)的血清抗體相比，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備的優(yōu)點(diǎn)。

（2）人工免疫時(shí)需要多次注射疫苗，增加抗原數(shù)量，其目的是加強(qiáng)機(jī)體免疫能力，增加體內(nèi)特定漿細(xì)胞的數(shù)量。

（3）RT-PCR技術(shù)是mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA再進(jìn)行PCR擴(kuò)增的過(guò)程。過(guò)程①使用了RT-PCR技術(shù)，與常規(guī)PCR技術(shù)相比較，RT-PCR增加了逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶。

（4）噬菌體在侵染大腸桿菌時(shí)，其遺傳物質(zhì)DNA進(jìn)入大腸桿菌體內(nèi)，并在大腸桿菌內(nèi)完成復(fù)制，因此含抗體基因片段最終需要整合到噬菌體DNA中。