Question

【題目】肌肉生長抑制素（MSTN）是肌細胞生長發(fā)育的負調控因子，MSTN基因突變能使肌肉量增加，從而提高瘦肉率。下圖是制備MSTN基因敲除豬的流程圖。

回答下列問題。

（1）體外培養(yǎng)胚胎干細胞時，應定期更換培養(yǎng)液，可防止________。

（2）用________處理2號豬能使其超數排卵。對卵母細胞去核常用________方法，去核的目的是_______。

（3）與體細胞相比，用胚胎細胞更容易獲得基因敲除豬，原因是________。

（4）為獲得較多MSTN基因敲除豬，在進行胚胎移植前可運用________技術。3號豬應滿足的條件是________。

（5）若要檢測MSTN基因敲除豬是否成功敲除MSTN基因，可采用________（答出1點即可）方法進行檢測。

Answer 1

【答案】細胞代謝產物對細胞造成傷害 促性腺激素 顯微操作去核法 保證重組胚胎核基因均來自于供體細胞 胚胎細胞分化程度低，全能性高 胚胎分割 有健康的體質和正常的繁殖能力，生理狀態(tài)可以受孕 DNA分子雜交；抗原-抗體雜交

【解析】

動物細胞培養(yǎng)：在動物細胞的培養(yǎng)液中需加入有機鹽、無機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸及血清（兩鹽、兩素、兩酸、一血清），以保證細胞的正常生命活動。

胚胎移植：一般將胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚時期即可進行移植，在移植之前可以進行胚胎性別鑒定確定胚胎性別，也可以進行胚胎分割，增加胚胎數目，但是注意在分割時需要將胚胎的內細胞團均等分割，保證分割后胚胎發(fā)育正常。

（1）在培養(yǎng)動物細胞時，定期更換培養(yǎng)液是防止細胞代謝產物對細胞造成傷害，保證細胞的正常生命活動。

（2）供體超數排卵是由于促性腺激素作用的結果，對于動物細胞常用的去核方法是顯微操作去核法，去除卵母細胞核的目的是保證重組胚胎核基因均來自于供體細胞。

（3）細胞全能性越高越容易發(fā)育成個體，胚胎細胞較體細胞分化程度低，全能性高，所以更容易發(fā)育成個體。

（4）為獲得更多個體，可以在胚胎移植前進行胚胎分割，從而得到更多基因型相同個體。3號豬為胚胎移植受體母豬，起代孕作用，所以應有健康的體質和正常的繁殖能力，并且生理狀態(tài)可以受孕。

（5）檢測MSTN基因敲除豬是否成功即檢測是否有MSTN基因或是否有相關表達產物，所以可以利用DNA分子雜交或抗原-抗體雜交技術檢測基因敲除是否成功。