Question

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

 

    注：圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。

（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來        ，理由是：                                   。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多的方法是          。

（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是           。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是，可以避免                        。

（4）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：            （用數(shù)字表示）。

①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

 

Answer 1

【答案】

（1）可以連接       因?yàn)橛蓛煞N不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補(bǔ)的）

（2）顯微注射技術(shù)

（3）為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因       發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

（4）②①③④

 【解析】（1）因?yàn)橛蓛煞N不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補(bǔ)的），所以不同限制酶切割形成的黏性末端可以連接起來。

（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法。

（3）GFP基因作為標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因。轉(zhuǎn)基因克隆豬可避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

（4）蛋白質(zhì)工程技術(shù)的操作順序是②①③④。