Question

【題目】今年非洲豬瘟導致大量生豬死亡，通過克隆豬來給生豬養(yǎng)殖戶提供豬仔是一條值得探索的途徑。早期胚胎細胞異常凋亡是目前克隆豬成功概率較低的主要原因，Bcl-2基因是細胞調(diào)亡抑制基因，用PCR技術可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平，進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋亡的關系�？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如圖。請回答下列問題

（1）圖中應選擇減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞進行核移植，原因是_______________，為了保證正常的二倍體核型，使用的良種豬體細胞一般都選擇__________代以內(nèi)的細胞。

（2）圖中X過程使用的酶是_______________，用PCR擴增Bcl-2基因。該技術的前提是要有一段已知__________________。根據(jù)這一序列設計合成引物，PCR擴增過程中使用的酶是_______________。

（3）在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進而計算總mRNA中Bcl-2的分子數(shù)，從而反映出_______________________。

（4）胚胎移植中，應選擇有__________________的個體作為受體母豬，并對受體母豬進行______處理。

Answer 1

【答案】減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞內(nèi)含有動物生長發(fā)育的全部信息及營養(yǎng)，有助于動物細胞核全能性的表達 10 逆轉(zhuǎn)錄酶(反轉(zhuǎn)錄酶) 核苷酸序列 Taq酶 Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平 健康體質(zhì)和正常繁殖能力 同期發(fā)情

【解析】

分析題圖：圖示為克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程圖，首先采用核移植技術，即將良種豬體細胞核移植到去核卵細胞中形成重組細胞；然后采用早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術；X表示以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA的過程。

（1）減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞內(nèi)含有動物生長發(fā)育的全部信息及營養(yǎng)，有助于動物細胞核全能性的表達，所以選擇該時期的卵母細胞進行核移植；由于10代以內(nèi)的細胞可保證正常的二倍體核型，因此使用的良種豬體細胞一般都選擇10代以內(nèi)的細胞。

（2）圖中X表示以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA的過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶；從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl-2基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設計合成引物用于PCR擴增；PCR擴增過程中由于是在高溫環(huán)境中進行DNA的復制所以需要Taq酶。

（3）在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進而計算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù)，由于mRNA是通過轉(zhuǎn)錄形成的，因此這能反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。

（4）胚胎移植中，應選擇有健康體質(zhì)和正常繁殖能力的個體作為受體母豬，并對受體母豬進行同期發(fā)情處理。