Question

（11分）2009年10月，我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻“華恢1號(hào)”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書(shū)。下圖表示該抗蟲(chóng)水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）殺蟲(chóng)基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于                工程技術(shù)范疇。除了上述方法，有些目的基因可以從基因文庫(kù)中獲取�；�因文庫(kù)包含                  和                  等類型，其中前者的基因中含有啟動(dòng)子。

（2）圖中③過(guò)程中，能促進(jìn)農(nóng)桿菌移向植物細(xì)胞的物質(zhì)是           類化合物。Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA中是利用T－DNA                                             的特點(diǎn)。

（3）植物基因工程中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外，還可采取的方法是                             （任舉一例）。

（4）對(duì)目的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯產(chǎn)物的檢測(cè)分別采用                 、                技術(shù)。

（5）組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

①人工改造時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因表達(dá)，在上圖所示基因表達(dá)載體中還應(yīng)添加               。

②人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的之一是除去或破壞質(zhì)粒上的               （填相應(yīng)基因的簡(jiǎn)寫(xiě)字母），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是                 。

 

Answer 1

【答案】

（1）蛋白質(zhì)     基因組文庫(kù)      部分基因文庫(kù)（或cDNA文庫(kù)）

（2）酚         可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞（并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上）

（3）基因槍法、花粉管通道法（答任一種給分）

（4）分子雜交　 抗原—抗體雜交

（5）①啟動(dòng)子    ②tmr、tms       CTGCAG（或GACGTC）

【解析】

試題分析：（1）殺蟲(chóng)基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)范疇。除了上述方法，有些目的基因可以從基因文庫(kù)中獲取�；�因文庫(kù)包含基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)等類型，其中前者的基因中含有啟動(dòng)子。

（2）圖中③過(guò)程中，能促進(jìn)農(nóng)桿菌移向植物細(xì)胞的物質(zhì)是酚類化合物。Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA中是利用T－DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的特點(diǎn)。

（3）植物基因工程中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外，還可采取的方法是基因槍法、花粉管通道法。

（4）對(duì)目的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯產(chǎn)物的檢測(cè)分別采用分子雜交、抗原—抗體雜交技術(shù)。

（5）人工改造時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因表達(dá)，在上圖所示基因表達(dá)載體中還應(yīng)添加啟動(dòng)子。人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的之一是除去或破壞質(zhì)粒上的tmr、tms，保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是CTGCAG（或GACGTC）。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。