Question

【題目】酵母菌的維生素、蛋白質(zhì)含量高，可生產(chǎn)食品和藥品等。科學家將大麥細胞的LTPl基因?qū)�入啤酒酵母菌中，獲得的啤酒酵母菌種可產(chǎn)生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒。基本的操作過程如圖所示，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）該技術(shù)的最大優(yōu)點是___________。

（2）從大麥細胞中可直接分離獲得LTP1基因，然后采用PCR大量擴增目的基因，其原理是___________。本操作中為了將LTPI基因?qū)�入酵母菌細胞�?nèi)，所用的載體是___________。

（3）要使載體與LTP1基因連接，首先應使用___________進行切割，然后用___________進行連接。

（4）切割完成后，采用___________酶將載體與LTP1基因連接，連接后得到的DNA分子稱為__________。

（5）此操作中可以分別用含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進行篩選，則有C進入的酵母菌在選擇培養(yǎng)基上的生長情況是___________。

（6）除了看啤酒泡沫豐富與否外，還可用什么方法檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表達？_________。

Answer 1

【答案】可定向改造生物的遺傳性狀體外雙鏈DNA復制質(zhì)粒限制酶DNA連接酶DNA連接重組DNA（重組質(zhì)粒）能在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活檢驗轉(zhuǎn)基因啤酒酵母菌能否產(chǎn)生LTP1蛋白

【解析】

分析題圖，圖示表示將使啤酒產(chǎn)生豐富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵母菌中，使其產(chǎn)生LTPl蛋白，釀出泡沫豐富的啤酒的過程；圖中A為獲取目的基因的過程；B為質(zhì)粒；C為基因表達載體（重組質(zhì)粒）。

（1）圖示采用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)，該技術(shù)最大的優(yōu)點是可以定向改造生物的遺傳性狀。

（2）PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是體外雙鏈DNA的復制；圖示將目的基因?qū)�入受體細胞所用的運載體是大腸桿菌的質(zhì)粒。

（3）（4）構(gòu)建基因表達載體時，需要用同種限制酶切割外源DNA分子（含LTP1基因的DNA片段）和運載體，以產(chǎn)生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶進行連接形成重組質(zhì)粒。

（5）從圖中可看出，目的基因插入到了質(zhì)粒的抗四環(huán)素基因中，從而破壞了抗四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)的完整性，但抗青霉素基因仍完整，因此含有重組質(zhì)粒的啤酒酵母菌在含青霉素的培養(yǎng)基上能存活，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活。

（6）除了看啤酒泡沫的豐富程度外，還可以通過檢驗轉(zhuǎn)基因啤酒酵母菌能否產(chǎn)生LTP1蛋白來檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中的表達情況。