Question

【題目】酵母菌種群數(shù)量的增長與實驗條件密切相關。科研人員試圖研究酵母菌接種量和溶氧量對酵母菌種群數(shù)量增長的影響。 設計以下實驗:

1．選擇生長旺盛的酵母菌為實驗材料，用移液器吸取設定的接種量（0．5mL、1．00mL、1．5mL） ，分別接種入相同體積的同種液體培養(yǎng)基。震蕩搖勻，吸取酵母菌懸液觀察計數(shù)作為初始值。將接種后的錐形瓶置于不同轉(zhuǎn)速的搖床中，28℃恒溫培養(yǎng)。

2．將錐形瓶中的培養(yǎng)液振蕩搖勻，用吸管每隔2h取樣1次，共取5 次。

3．取清潔干燥的血球計數(shù)板制作裝片，先用低倍鏡找到計數(shù)室，然后換成高倍鏡觀察計數(shù)。

4．記錄測量結(jié)果，繪制相關曲線，結(jié)果如下圖

分析圖中數(shù)據(jù)，回答下列問題：

（1）結(jié)果要分析： 培養(yǎng)液中 的濃度。

（2）在實驗實施過程中，一般要先采用 的方法對培養(yǎng)基進行滅菌。若制備裝片時，將清潔干燥的血球計數(shù)板先在計數(shù)室上滴1小滴酵母菌液，靜置5 min再蓋上蓋玻片，測量的結(jié)果會 。

（3）若本實驗使用的計數(shù)板規(guī)格如右圖，在計數(shù)時一般采用 法計數(shù)。

在實驗中，最初計數(shù)時發(fā)現(xiàn)所選取的樣方中方格酵母菌總數(shù)為零，這時正確的做法是：

A．將裝片清洗干凈，重新制備裝片進行計數(shù)

B．將樣液稀釋后重新進行制備裝片并計數(shù)

C．尋找有酵母菌的中方格，然后取其平均值計數(shù)

D．直接統(tǒng)計中間整個大方格中的細胞總數(shù)

（4）分析實驗數(shù)據(jù)圖，可以發(fā)現(xiàn)條件為 時測得種群密度最高，此時的酵母菌培養(yǎng)液不適合用來制作固定化酵母，原因是 。適合制作固定化酵母的酵母菌培養(yǎng)液條件為 。

Answer 1

【答案】

（1）接種量 氧氣

（2）高壓蒸汽滅菌 偏高

（3）五點取樣法 D

（4）轉(zhuǎn)速250r/min，接種量為1．5mL,培養(yǎng)第六個小時 種群達到峰值后，由于營養(yǎng)大量消耗、代謝產(chǎn)物增加，酵母菌大量死亡影響固定化酵母的活性 轉(zhuǎn)速230r/min，接種量為1．5mL,培養(yǎng)第8個小時

【解析】

（1）要研究酵母菌接種量和溶氧量對酵母菌種群數(shù)量增長的影響，因此自變量為酵母菌接種量和溶氧量，因此結(jié)果要分析接種量培養(yǎng)液中的氧氣濃度。

（2）對培養(yǎng)基要用高壓蒸汽滅菌法對其進行滅菌，先將培養(yǎng)液滴加到血球計數(shù)板的計數(shù)室中再蓋上蓋玻片計數(shù)，由于已加入的液滴的表面張力作用使其未能嚴密的蓋到計數(shù)板表面上，使計數(shù)室內(nèi)的體積增大，從而使計數(shù)結(jié)果偏高。

（3）血球計數(shù)板計數(shù)時一般采用五點取樣法，已減少誤差。所選取的樣方中方格酵母菌總數(shù)為零，可以直接統(tǒng)計中間整個大方格中的細胞總數(shù)。

（4）由曲線結(jié)果可知，條件為250r/min，接種量為1．5mL，培養(yǎng)第六個小時，測得種群密度最高。制作固定化酵母，要保持酵母活性高，但當種群達到峰值后，由于營養(yǎng)大量消耗、代謝產(chǎn)物增加，酵母菌大量死亡，酵母菌的活性減低，因此不適合做固定化酵母細胞。種群數(shù)量少，適合做固定化酵母細胞，因此適合制作固定化酵母的酵母菌培養(yǎng)液條件為轉(zhuǎn)速230r/min，接種量為1．5mL,培養(yǎng)第8個小時。