Question

【題目】某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌．分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸菌能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣．回答下列問題：

（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用______對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是______．

（2）推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有______和______．分離純化時(shí)應(yīng)挑選出______的菌落作為候選菌．

（3）乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的______（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）．

Answer 1

【答案】無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸 利于乳酸菌的識(shí)別和分離 在平板上有透明圈 甘油

【解析】

（1）泡菜的制作原理
泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。
（2）測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理
在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)對(duì)比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量。
（3）泡菜的制作

（2）亞硝酸鹽含量的測(cè)定操作過程

（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋；進(jìn)行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。

（2）在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識(shí)別和分離；分離純化時(shí)應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。

（3）乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的甘油，即甘油管藏法。