Question

【題目】科學(xué)家利用基因工程技術(shù)將魚的抗凍蛋白基因?qū)�入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。�?qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）PCR技術(shù)的關(guān)鍵是耐高溫的DNA聚合酶。DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能________，因此，DNA復(fù)制需要引物。

（2）提取魚的抗凍蛋白基因的mRNA進(jìn)行________得到目的基因，在對(duì)目的基因擴(kuò)增時(shí)，需要________種引物，若計(jì)劃用1個(gè)目的基因?yàn)槟０瀚@得m（m大于2）個(gè)目的基因，則需要的引物總量是________個(gè)。

（3）PCR利用DNA熱變性原理，通過(guò)控制________控制雙鏈的解聚與結(jié)合。

（4）PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為________、________、________三步。在循環(huán)之前，需要進(jìn)行一次預(yù)變性，以便增加________。

Answer 1

【答案】從3撇端延伸DNA 逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄） 2 溫度 變性 復(fù)性 延伸 DNA徹底變性的概率

【解析】

PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三步。在循環(huán)之前，常需要進(jìn)行一次預(yù)變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。

PCR過(guò)程為:

變性，當(dāng)溫度上升到90 ℃以上時(shí)，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。

復(fù)性，當(dāng)溫度降低到50℃左右是，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。

延伸，溫度上升到72 ℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。

（1）PCR技術(shù)是在較高溫度下完成的，故該過(guò)程中需要耐高溫的DNA聚合酶。DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能從3’端延伸DNA，因此，DNA復(fù)制需要引物。

（2）提取魚的抗凍蛋白基因的mRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）得到目的基因，在對(duì)目的基因擴(kuò)增時(shí)，由于DNA復(fù)制時(shí)的模板是解開的DNA分子的兩條鏈，故需要2種引物，若計(jì)劃用1個(gè)目的基因?yàn)槟０瀚@得m（m大于2）個(gè)目的基因，因?yàn)槊總�(gè)新合成的目的基因的兩條鏈的一端都含有一個(gè)引物，又DNA為雙鏈，故m個(gè)基因應(yīng)該有2m個(gè)引物，原來(lái)的模板鏈中不含引物，則需要的引物總量是個(gè)。

（3）PCR利用DNA熱變性原理，其過(guò)程包括，高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸，即PCR技術(shù)是通過(guò)控制溫度的高低來(lái)控制雙鏈的解聚與結(jié)合的。

（4）PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三步。在循環(huán)之前，需要進(jìn)行一次預(yù)變性，其目的是增加DNA徹底變性的概率。