利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如圖所示)。 圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。從理論上推測(cè),第四輪循環(huán)產(chǎn)物中同時(shí)含有引物A和B的DNA片段所占的比例為


  1. A.
    15/16
  2. B.
    14/16
  3. C.
    16/16
  4. D.
    1/16
B
DNA復(fù)制為半保留復(fù)制,DNA復(fù)制n次,共形成2n個(gè)DNA,其中兩個(gè)DNA含有母鏈和子鏈(引物A或引物B),(2n-2)個(gè)DNA都含有子鏈(含有引物A和引物B)。第四輪循環(huán)即DNA復(fù)制4次,共形成16個(gè)DNA,其中2個(gè)DNA含有引物A或引物B,14個(gè)DNA含有引物A和引物B,占14/16。
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科目:高中生物 來(lái)源:2011-2012學(xué)年福建省上杭一中高二下學(xué)期期末考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題

T-DNA可能隨機(jī)插入植物基因組內(nèi),導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時(shí),將地上部分浸入農(nóng)桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為T1代)。

環(huán)狀DNA示意圖
A、B、C、D表示能與相應(yīng)T—DNA鏈
互補(bǔ)、長(zhǎng)度相等的單鏈DNA片段;
箭頭指示DNA合成方向。
(1)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體,需將T1代播種在含         的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),成熟后目交,收獲種子(稱為T2代)。
(2)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將T2代播種在含         的培養(yǎng)基上,獲得所需個(gè)體。 
(3)經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起,需將該突變體與         植株進(jìn)行雜交,再自交         代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。
(4)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失,從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性         。
(5)根據(jù)T-DNA的已知序列,利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。
其過程是:提取         植株的DNA,用限制酶處理后,再用         將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如下圖)。以此為模板,從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取         作為引物進(jìn)行擴(kuò)增,得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

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科目:高中生物 來(lái)源:2013屆福建省高二下學(xué)期期末考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題

 T-DNA可能隨機(jī)插入植物基因組內(nèi),導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時(shí),將地上部分浸入農(nóng)桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為T1代)。

環(huán)狀DNA示意圖

A、B、C、D表示能與相應(yīng)T—DNA鏈

互補(bǔ)、長(zhǎng)度相等的單鏈DNA片段;

箭頭指示DNA合成方向。

    (1)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體,需將T1代播種在含          的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),成熟后目交,收獲種子(稱為T2代)。

(2)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將T2代播種在含          的培養(yǎng)基上,獲得所需個(gè)體。 

    (3)經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起,需將該突變體與          植株進(jìn)行雜交,再自交          代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。

    (4)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失,從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性          。

    (5)根據(jù)T-DNA的已知序列,利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。

其過程是:提取          植株的DNA,用限制酶處理后,再用          將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如下圖)。以此為模板,從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取          作為引物進(jìn)行擴(kuò)增,得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

 

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