Question

【題目】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。

據(jù)圖回答下列問題：

（1）過程①所需的酶是 。

（2）過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的 存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。

（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是

。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。

（4）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖，通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

（5）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株14進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株14中一定是雜種植株的有 。

（6）對(duì)雜種植株進(jìn)行 接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。

Answer 1

【答案】⑴纖維素酶和果膠酶 ⑵葉綠體 ⑶保持原生質(zhì)體完整性 細(xì)胞壁

⑷雙親（或花椰菜和黑芥 ） 解離 漂洗 ⑸1、2、4 ⑹黑腐病菌

【解析】

⑴要得到植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞，使細(xì)胞壁分解。⑵由于要培養(yǎng)的是抗黑腐病的花椰菜，所以需要供體含有黑腐病抗性基因，供體是由光照培養(yǎng)的黑芥苗提供的，所以供體一定含有葉綠體。⑶原生質(zhì)體培養(yǎng)液中加入甘露醇其作用是避免原生質(zhì)體吸水漲破，原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，才能進(jìn)行分裂分化。⑷要看再生植株染色體變異類型需要觀察再生植株與雙親的染色體差異，觀察染色體需要經(jīng)過解離漂洗染色和制片幾個(gè)過程。⑸再生植株1、2、4同時(shí)含有花椰菜和黑芥的基因組，所以一定是雜種植株。⑹黑腐病菌的抗性基因進(jìn)入到雜種植物體內(nèi)，雜種植株能抗黑腐病，所以對(duì)雜種植株進(jìn)行病菌接種實(shí)驗(yàn)，是篩選雜種植株的方法。