Question

【題目】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線(xiàn)處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如圖1．

（1）植物細(xì)胞融合技術(shù)中過(guò)程①需要利用_____ 酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過(guò)程②用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞融合，細(xì)胞層面可能會(huì)得到兩兩融合的細(xì)胞類(lèi)型有_____種．供體葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體與根細(xì)胞原生質(zhì)體比較所特有的結(jié)構(gòu)是_____，該結(jié)構(gòu)的有無(wú)可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．

（2）③④培養(yǎng)過(guò)程中在培養(yǎng)基成分上的區(qū)別主要是_____的不同．④過(guò)程還先后包括下列哪些操作順序_____．

①誘導(dǎo)形成芽　②取合適外植體　③誘導(dǎo)形成未分化狀態(tài)的細(xì)胞　④誘導(dǎo)形成根

（3）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA 通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，可以得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定．圖2是用該引物對(duì)雙親及再生植株1﹣4 基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增的結(jié)果．據(jù)圖判斷，再生植株1﹣4中一定是雜種植株的有_____．

（4）若要篩選出具有高抗性的雜種植株．可對(duì)以上雜種植株分別進(jìn)行_____接種實(shí)驗(yàn)．

Answer 1

【答案】纖維素酶和果膠酶 3 葉綠體 細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例（激素的種類(lèi)和比例） ①④ 1、2、4 黑腐病菌

【解析】

（1）植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，通常用纖維素酶和果膠酶酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體。兩種細(xì)胞兩兩融合，有同種細(xì)胞融合和兩種細(xì)胞間融合，共有三種類(lèi)型。葉肉細(xì)胞與根細(xì)胞比較所特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，是初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。

（2）③④分別是去分化和再分化，在培養(yǎng)基成分上的區(qū)別主要是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例的不同。再分化的過(guò)程包括把誘導(dǎo)形成芽、誘導(dǎo)形成根，即①④。

(3)花椰菜基因組含有堿基對(duì)為300和600的DNA片段,黑芥基因組含有堿基對(duì)為1 000、1 300和1 500的片段,再生植株3,只含有長(zhǎng)度為300和600的片段,與花椰菜一致,1、2、4既含有花椰菜DNA片段,又含有黑芥DNA片段,為雜種植株。

(6)對(duì)雜種植株接種黑腐病菌,若不患黑腐病即為具有高抗性的雜種植株。