Question

今年甲型H1N1流感在美國、墨西哥等國先后爆發(fā)。甲型H1N1流感的傳播速度非常快，為防治疫情，各國研究小組紛紛進行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作。下面為某研究小組的前期研究工作的簡要操作流程圖：

（1）實驗步驟①所代表的反應過程是     。
（2）實驗中常采用PCR擴增得到H基因, PCR過程中使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內的DNA聚合酶，其主要特點是           。PCR過程中退火（復性）溫度必須根據引物的堿基數量和種類來設定。表1為根據模板設計的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？____ ______。

（3）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用的酶是     ，其作用部位為兩個核苷酸之間的              鍵。
（4）構建重組表達載體時，一般需要將H基因與載體結合，常用的載體除質粒外還有
         等，在檢測受體細胞中是否已經導入目的基因時，常常要借助載體上            的表達。
（5）甲型H1N1流感患者常出現體溫升高的癥狀，人體的體溫調節(jié)中樞位于         。若某人為甲型H1N1流感疑似患者，在確診時可從疑似患者體內分離病毒與已知病毒進行
        比較。

Answer 1

⑴逆轉錄  ⑵耐高溫   B  ⑶限制性內切酶和DNA連接酶 磷酸二酯鍵
⑷噬菌體的衍生、動植物病毒   標記基因  ⑸下丘腦 基因（核酸）的堿基序列

解析試題分析：步驟①是以RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程。PCR過程中使用的是耐高溫DNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）。A和T之間有2個氫鍵，C和G之間有3個氫鍵，所以C和G含量越高，DNA越穩(wěn)定，也越能耐高溫，比較引物A和B可知B對引物穩(wěn)定性較高，可采用較高的退火溫度。構建重組表達載體時，需要用限制酶切割運載體和含有目的基因的外源DNA分子，再用DNA連接酶將兩者連接形成重組DNA，這兩種酶的作用部位都是磷酸二酯鍵�；�因工程的運載體有質粒、動植物病毒和噬菌體，其中質粒是常用的載體。在檢測受體細胞中是否已經導入目的基因時，常常要借助載體上標記基因的表達。下丘腦是人體的體溫調節(jié)中樞。若某人為甲型H1N1流感疑似患者，在確診時可從疑似患者體內分離病毒與已知病毒進行基因（核酸）的堿基序列比較。
考點：本題考查基因工程的相關知識。
點評：本題以圖為載體，考查基因工程的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解能力，屬于中等難度題。