Question

【題目】三孢布拉氏霉菌具有β－胡蘿卜素含量高.易于培養(yǎng)等特點(diǎn)而廣泛用于工業(yè)化β－胡蘿卜素的生產(chǎn)。

下圖l是在發(fā)酵罐內(nèi)三孢布拉氏霉菌菌體生物量及β－胡蘿卜素產(chǎn)量隨時(shí)間變化曲線圖。圖2是樣品層析結(jié)果及與β一胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣的比對(duì)。請(qǐng)回答下列問題：

（1）用稀釋涂布平板法篩選和純化三孢布拉氏霉菌，配制稀釋倍數(shù)為101~106的系列稀釋液時(shí)，需用移液管將1mL菌液移入盛有__mL蒸餾水的試管中。對(duì)同一濃度的稀釋液，分別用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)和稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，若不存在實(shí)驗(yàn)誤操作，則后者的數(shù)量少于前者，其原因是_______。若要所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作.多次重復(fù)外，還應(yīng)該保持待測(cè)樣品稀釋的________________。

（2）不同的材料選用的提取方法不同。用萃取法提取胡蘿卜素，但從橘皮中提取精油應(yīng)采用___法；為了提高出油率，壓榨前采用的方法是_________。

（3）圖2為萃取的胡蘿卜素樣品通過紙層析進(jìn)行鑒定的結(jié)果。從圖中分析可知，色帶__為β－胡蘿卜素。出現(xiàn)樣品2的結(jié)果，可能原因有：①在萃取過程中__（A. 萃取溫度高，時(shí)間長(zhǎng)／B. 干燥溫度高，時(shí)間長(zhǎng)）；②在鑒定過程中__（A. 未經(jīng)濃縮蒸餾／B. 點(diǎn)樣太快，樣點(diǎn)�。�。

Answer 1

【答案】 9 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 比例合適 壓榨 將橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡 Ⅰ B A

【解析】試題分析：圖1中，在發(fā)酵罐內(nèi)利用三孢布拉氏霉發(fā)酵生產(chǎn)β-胡蘿卜素過程中，β-胡蘿卜素產(chǎn)量應(yīng)該是三孢布拉氏霉處于穩(wěn)定期時(shí)進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)時(shí)獲得的產(chǎn)量最高。圖2表示用紙層析法鑒定胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)過程。

（1）進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，需要將1mL菌液移入盛有9ml的無菌水中。使用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，而導(dǎo)致結(jié)果可能會(huì)偏小。若要所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作.多次重復(fù)外，還應(yīng)該保持待測(cè)樣品稀釋的比例合適。

（2）橘皮精油的提取常用壓榨法，為了提高出油率，壓榨前需將橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡時(shí)間為10h以上，這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫。

（3）據(jù)圖分析，色素帶Ⅰ與標(biāo)準(zhǔn)樣色素帶一致，故其為β胡蘿卜素，出現(xiàn)樣品2胡蘿卜素含量減少的結(jié)果，可能原因是在操作過程中干燥溫度高，時(shí)間長(zhǎng)或未經(jīng)濃縮蒸餾，導(dǎo)致色素被破壞。萃取溫度高，會(huì)導(dǎo)致雜質(zhì)增多；點(diǎn)樣太快會(huì)出現(xiàn)樣品1的現(xiàn)象。