Question

【題目】研究性學(xué)習(xí)小組為了探究酵母菌種群在不同溫度條件下種群密度的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)行了

如下實(shí)驗(yàn)：

第一步：配制無菌葡萄糖培養(yǎng)液和活化酵母菌液。

第二步：按右表步驟操作。

第三步：用血球計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)起始酵母菌數(shù)，并做好記錄。

第四步：將各裝置放在其他條件相同且適宜的條件下培養(yǎng)。

第五步：連續(xù)7天，每天取樣計(jì)數(shù)，做好記錄。

請回答下列問題：

（1）從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，需將試管________，目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻，以保證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差。

（2）某同學(xué)用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，在顯微鏡下觀察到如圖所示的現(xiàn)象，則應(yīng)采取的措施是____________。

（3）在計(jì)數(shù)時(shí)，按以下順序操作________（填字母順序），稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，再將計(jì)數(shù)板放在顯微鏡的載物臺(tái)上計(jì)數(shù)。

A．吸管吸取培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣

B．蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上

C．多余培養(yǎng)液用濾紙吸去

（4）步驟五中每天應(yīng)__________對兩組酵母菌進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)，研究人員將樣液稀釋10倍，采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1 mm×1 mm×0.1 mm）計(jì)數(shù)，觀察到的計(jì)數(shù)室中細(xì)胞分布如下圖，則1mL混合樣液中含有酵母菌約為__________個(gè)。

（5）在實(shí)驗(yàn)過程中，培養(yǎng)液的pH值變化為_____（填“變大”“變小”“基本不變”）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計(jì)數(shù)板的做法是錯(cuò)誤的，正確的方法是______________。

Answer 1

【答案】振蕩 先稀釋再計(jì)數(shù) B→A→C 定時(shí)（固定時(shí)間） 3.5×107 變小 浸泡和沖洗

【解析】

①采用抽樣檢測法對酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，為了使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，減少誤差，應(yīng)從振蕩搖勻的試管中取1mL培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋，然后將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用吸水紙吸干，再將計(jì)數(shù)板放在顯微鏡的載物臺(tái)上計(jì)數(shù)。②實(shí)驗(yàn)過程中，酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的CO2會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液的pH值變小。③觀察到的視野中，一個(gè)中方格內(nèi)含有14個(gè)酵母菌，該中方格含有16個(gè)小方格，說明所使用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室有25個(gè)中方格。

(1) 為了使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻，減少誤差，從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，需將試管振蕩。

(2) 在顯微鏡下觀察到的如圖所示的視野內(nèi)，酵母菌的密度過大，不便對其計(jì)數(shù)，所以應(yīng)采取的措施是：先稀釋再計(jì)數(shù)。

(3) 利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，然后用吸管吸取培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣，待培養(yǎng)液從邊緣處自行滲入計(jì)數(shù)室內(nèi)，再用濾紙吸去多余培養(yǎng)液并靜置片刻；待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，再將計(jì)數(shù)板放在顯微鏡的載物臺(tái)上計(jì)數(shù)。可見，正確的操作順序?yàn)锽→A→C。

(4) 步驟五中，對酵母菌計(jì)數(shù)時(shí)的取樣時(shí)間為無關(guān)變量，應(yīng)控制相同，即每天應(yīng)定時(shí)（固定時(shí)間）對兩組酵母菌進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)。依題意和圖示分析可知：對酵母菌計(jì)數(shù)時(shí)，所使用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室有25個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格。視野中一個(gè)中方格內(nèi)的酵母菌數(shù)目為14個(gè)，則計(jì)數(shù)室的酵母菌總數(shù)為14×25＝350個(gè)，而計(jì)數(shù)室的體積為1×1×0.1＝0.1mm3＝1×10－4mL；由于計(jì)數(shù)之前將樣液稀釋10倍，則1mL混合樣液中含有酵母菌約為350×10÷（1×10－4）＝3.5×107個(gè)/mL。

(5) 在實(shí)驗(yàn)過程中，酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的CO2溶解在培養(yǎng)液中，導(dǎo)致培養(yǎng)液的pH值變小。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計(jì)數(shù)板的做法是錯(cuò)誤的，因?yàn)檠�球�?jì)數(shù)板上的刻度較精細(xì)，用試管刷蘸洗滌劑擦洗會(huì)破壞血球計(jì)數(shù)板的刻度，所以正確的方法是將血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行浸泡和沖洗。