Question

【題目】淀粉酶在工業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用最早，迄今仍是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑產(chǎn)品之一。為了提高淀粉酶的生產(chǎn)水平，首先要從土壤中篩選出產(chǎn)淀粉酶的活性菌株。某研究人員對所取土樣進行產(chǎn)淀粉酶的細菌的分離操作（A組）和計數(shù)操作（B組），過程如圖Ⅰ。圖Ⅱ是一種接種方法示意圖。請回答下列問題：

（1）步驟③、④所用培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是______種類不同。

（2）步驟④、⑤所用培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是固體培養(yǎng)基中添加了______。步驟⑤、⑧接種時需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對照，目的是______。

（3）步驟⑦中，將1mL菌液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度經(jīng)過步驟⑧各在3個平板上接種（每個平板的接種量為0.1mL），經(jīng)適當培養(yǎng)后，2組平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為______個，據(jù)此可推測適宜的土壤稀釋倍數(shù)為______倍。

（4）圖Ⅱ所用的接種方法______（填“能”或“不能”）對活菌進行計數(shù)；甲、乙、丙為劃線的三個區(qū)域，為正確完成整個接種過程，接種環(huán)要進行______次灼燒滅菌，其中滅菌目的相同的是第______次。

Answer 1

【答案】碳源 瓊脂 檢測培養(yǎng)基是否被污染 5.8×106 10 不能 4 第二、三次

【解析】

步驟①所用的小鐵鏟需采用干熱滅菌法進行滅菌處理；步驟②為無菌水制成的菌液；步驟③為擴大培養(yǎng)；步驟④為選擇培養(yǎng)；步驟⑤為固體培養(yǎng)基接種；步驟⑦⑧⑨為微生物的分類計數(shù)；II為平板劃線法。

（1）步驟③為擴大培養(yǎng)，而步驟④為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，因此所用的培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是碳源種類不同，即選擇培養(yǎng)基中需要以淀粉作為唯一碳源。

（2）步驟④為液體培養(yǎng)基，步驟⑤為固體培養(yǎng)基，兩者的主要區(qū)別是固體培養(yǎng)基中需添加瓊脂成分；為檢測培養(yǎng)基是否被污染，步驟⑤、⑧接種時需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對照；

（3）應(yīng)選擇數(shù)目在30-300之間的平板進行計數(shù)，故稀釋倍數(shù)是10的濃度較為合適，每升菌液中的活菌數(shù)為（59＋57＋58）/3÷0.1×10×103=5.8×106 個；

（4）圖Ⅱ所用的接種方法為平板劃線法，該方法不能對活菌進行計數(shù)；據(jù)圖分析，共甲、乙、丙為劃線的三個區(qū)域，為正確完成整個接種過程，劃線前及劃線結(jié)束都要進行灼燒滅菌，共4次，其中第二、三次均是為了殺滅接種環(huán)上的存留的菌種，兩次目的相同。