Question

【題目】已知SAPS是由一種RNA病毒感染所引起的疾�。甋ARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體．某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作．其簡要的操作流程如下：

（1）實驗步驟①所代表的反應(yīng)過程是 ．
（2）步驟②構(gòu)建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制鞋內(nèi)切酶和酶，后者的作用出是將限制性內(nèi)切酶切割的和連接起來．
（3）如果省略步驟③而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能 ， 也不 ．
（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可與進行抗原一抗體特異性反應(yīng)實驗，從而得出結(jié)論．
（5）步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基序列（相同、不同），根本原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）逆轉(zhuǎn)錄
（2）DNA連接；目的基因；載體
（3）復(fù)制；以其為模板合成S基因的mRNA（或轉(zhuǎn)錄）
（4）大腸桿菌中表達的S蛋白；SARS康復(fù)病人血清
（5）相同；表達蛋白質(zhì)所用的基因相同
【解析】解：（1）實驗步驟①RNA控制DNA合成，該過程是逆轉(zhuǎn)錄．（2）步驟②構(gòu)建重組表達載體A和重組表達載體B，必須使用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA．（3）如果省略步驟③基因表達載體的構(gòu)建，而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進行復(fù)制，也不能進行以其為模板合成S基因的mRNA（或轉(zhuǎn)錄）．（4）步驟④檢測所表達的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復(fù)病人血清進行抗原﹣抗體特異性反應(yīng)實驗，如果能夠特異性的結(jié)合，說明表達成功．（5）步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達蛋白質(zhì)所用的目的基因相同．
故答案為：（1）逆轉(zhuǎn)錄；（2）DNA連接；目的基因；載體；（3）復(fù)制；以其為模板合成S基因的mRNA（或轉(zhuǎn)錄）；（4）大腸桿菌中表達的S蛋白；SARS康復(fù)病人血清；（5）相同；表達蛋白質(zhì)所用的基因相同
根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄的概念分析（1）．根據(jù)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用分析（2）．根據(jù)S基因在大腸桿菌中不能進行復(fù)制，也不能轉(zhuǎn)錄分析（3）．根據(jù)抗原一抗體特異性反應(yīng)分析（4）．根據(jù)基因控制蛋白質(zhì)的合成分析．