Question

【題目】Ⅰ．酸雨主要是大氣中所含的S02造成的。研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，進行了相關實驗。回答下列問題：

（1）采集菌種：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域采集土樣，取樣用的小鐵鏟和盛裝土樣的信封在使用前都需要____________。將采集的土樣進行稀釋處理后，接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

（2）分離目的菌:將目的菌轉移到含少量無菌水的錐形瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入S02，馴化幾分鐘后接種到固體培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通S02的時間，與此同時逐步降低培養(yǎng)基的pH。由此分離得到的目的菌具有較強的____________的能力。

（3）活菌計數(shù):為獲得大量目的菌用于生產，在培養(yǎng)過程中需連續(xù)取樣進行計數(shù)。____________法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目。通常情況下，用此方法得到的活菌數(shù)目往往比實際數(shù)目____________（填“高”或“低”）。

（4）檢測目的菌對抗生素的敏感性:取該單菌落適當稀釋后的液體2滴，接種于固體培養(yǎng)基表面，并用___________使菌液均勻分布。在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時后，將大小相同且分別含有不同抗生素的圓紙片均勻置于該平板的不同位置，再培養(yǎng)一段時間，結果如下圖所示（圓紙片周圍的白色區(qū)域表示沒有菌落分布），據(jù)此實驗結果推測，五種抗生素中對該菌抑制作用最強的是_____________________（答序號和名稱）。

（5）菌種保存:采用平板劃線法分離純化得到了脫硫細菌，可以采用____________的方法，對菌種長期保存。

Ⅱ．“樹橘柚者，食之則甘，嗅之則香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季節(jié)。橘子全身都是寶；不僅果肉的營養(yǎng)價值高，藥用價值也高，其皮、核、絡、葉都是“地道藥材”�；卮鹣铝袉栴}：

（1）常采用壓榨法提取橘皮精油。若采取水蒸氣蒸餾法提取，由于橘皮精油的有效成分會發(fā)生______；若采用水中蒸餾法又會產生_________的問題所以一般采用壓榨法。

（2）提取橘皮精油的實驗流程為：①石灰水浸泡→②_______→③壓榨→④______→⑤靜置→⑥再次過濾→橘皮油。其中，③過程一般加入相當于橘皮質量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，其目的是利于橘皮精油___________。

（3）若想利用橘子生產果酒需要用到酵母菌。果汁發(fā)酵后是否有酒精產生，可用___________來檢驗。

（4）若想利用橘子生產果醋需要用到醋酸菌。醋酸菌的最適生長溫度為___________。

Ⅲ．(1)如圖為腐乳制作的流程示意圖,請據(jù)圖分析回答下列問題.

鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的,鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等,含量一般控制在12%左右；所加酒的作用之一是能使腐乳具有________________________。

（2）回答下列有關泡菜制作的習題：

制作泡菜時，為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是 ___________________；泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵過程即為乳酸菌進行___________的過程；泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有溫度、__________和__________等。

Answer 1

【答案】滅菌利用SO2稀釋涂布平板低涂布器青霉素甘油管藏部分水解原料焦糊漂洗過濾與水分離酸性重鉻酸鉀30—35℃獨特的香味增加乳酸菌數(shù)量無氧呼吸食鹽用量腌制時間

【解析】

根據(jù)實驗目的可知，實驗需要獲得“煙氣脫硫的脫硫細菌”，因此需要使用選擇培養(yǎng)基將該菌篩選出，即題中的“馴化”。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)；在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。橘皮精油無色透明，主要儲存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，又會產生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法提取，其提取過程為：石灰水浸泡→漂洗→壓榨→過濾→靜置→再次過濾→橘皮精油。參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理是其進行的有氧呼吸和無氧呼吸。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。在腐乳的制作過程中，毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠將蔬菜中的葡萄糖氧化為乳酸。

Ⅰ．（1）為了防止雜菌的污染，取樣用的小鐵鏟和盛裝土樣的信封在使用前都需要滅菌。

（2）根據(jù)馴化過程可知，馴化過程中不斷通入SO2，并且延長時間，與此同時逐步降低培養(yǎng)基的pH，因此分離得到的脫硫細菌具有較強的利用SO2和耐酸的能力。

（3）稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目；由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此用此計數(shù)方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。

（4）用稀釋涂布平板法接種時所用的涂布工具是涂布器；據(jù)圖分析，青霉素圓紙片周圍的透明圈最大，說明五種抗生素中對該菌抑制作用最強的是青霉素。

（5）長期保存菌種一般采用甘油管藏法，即將菌液與滅菌的甘油混勻，放在-20℃的冰箱中保存一年。

Ⅱ．（1）提取橘皮精油時，若采取水蒸氣蒸餾法提取，橘皮精油的有效成分會發(fā)生部分水解；若采用水中蒸餾法又會產生原料焦糊的問題，因此提取橘皮精油常常用壓榨法。

（2）提取橘皮精油的實驗流程為：石灰水浸泡→漂洗→壓榨→過濾→靜置→再次過濾→橘皮油，其中壓榨步驟加入相當于橘皮質量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4的目的是讓橘皮精油與水分離。

（3）酵母菌無氧呼吸產生的酒精可以用酸性重鉻酸鉀進行檢測。

（4）醋酸菌生長的最適宜溫度為30-35℃。

Ⅲ．（1）腐乳制作過程中，鹵湯中加入料酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。

（2）陳泡菜液含有較多的乳酸菌，可為泡菜發(fā)酵提供更多的菌種，因此為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液；乳酸發(fā)酵是利用了乳酸菌的無氧呼吸；泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有溫度、食鹽用量和腌制時間等。