Question

【題目】轉基因抗除草劑玉米培育過程如下，請回答下列問題。

（Ampx表示氨卡青霉素抗性基因 Tetr表示四環(huán)素抗性基因）

（1）為了讓目的基因與質(zhì)粒DNA合理重組，同時便于篩選重組質(zhì)粒，選用的限制酶最可能為_______。

（2）外源基因?qū)�入受體菌后需要進行篩選，如用含氨卡青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，能篩選出含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒和_________的單菌落，若要篩選含有重組質(zhì)粒的單菌落，還需要使用含有_____-的固體培養(yǎng)基。

（3）含有目的基因的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織后，篩選轉化的愈傷組織，需要使用含______的選擇培養(yǎng)基。由愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，一條是器官發(fā)生途徑，另一條是______途徑。具體通過哪一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中________的種類及其濃度配比。

（4）得到再生植株后，要確認目的基因是否在再生植株中正確表達，應檢測此再生植株中該基因的_______。如果檢測結果呈陽性，再在田間試驗檢測植株的抗性。

Answer 1

【答案】酶F、酶G 質(zhì)粒 四環(huán)素 除草劑 胚狀體發(fā)生途徑 激素 表達產(chǎn)物

【解析】

依題圖可知，構建基因表達載體是基因工程中的關鍵步驟，其中所選的限制酶既能切下目的基因，又不會破壞質(zhì)粒上的標記基因；需要根據(jù)標記基因所表達的標記性狀篩選含有重組質(zhì)粒的受體細胞；根據(jù)目的基因在受體細胞內(nèi)是否表達出產(chǎn)物來判斷轉基因抗除草劑玉米是否培育成功。以此基因工程中相關知識做出解答。

（1）依題圖可知，為了讓目的基因與質(zhì)粒DNA合理重組，同時便于篩選重組質(zhì)粒，做到既能得到目的基因，又不破壞質(zhì)粒上的標記基因，所以選用的限制酶最可能為酶F和酶G。

（2）識圖可知，表達載體上含有完整的氨卡青霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞，所以用含氨卡青霉素的培養(yǎng)基對受體菌進行篩選，能篩選出含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒和質(zhì)粒的單菌落，若要篩選含有重組質(zhì)粒的單菌落，還需要使用含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基。

（3）依題文可知，篩選轉化的愈傷組織即含有目的基因的愈傷組織，需要使用含除草劑的選擇培養(yǎng)基。結合題干信息可知，愈傷組織形成完整植株的途徑：器官發(fā)生途徑和胚狀體發(fā)生途徑。具體通過哪一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中激素的種類及其濃度配比。

（4）根據(jù)基因工程的實施步驟可知，目的基因是否在再生植株中正確表達，應檢測再生植株中該基因的表達產(chǎn)物是否出現(xiàn)。