Question

【題目】【加試題】回答下列（一）、（二）小題：

（一）請回答與“固定化酶”實驗有關的問題：

（1）—淀粉酶可以通過培養(yǎng)枯草桿菌來生產， 是篩選高表達量菌株的最簡便方法之一。篩選出的菌株在發(fā)酵生產之前還需利用 培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)。

（2）利用物理或化學的方法將—淀粉酶固定后，成為 且又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時，在裝柱后需要用 緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生 為止。

（3）將淀粉溶液以一定流速從反應柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進行KI-I2顏色測試，結果不呈現紅色。對此現象的解釋錯誤的是

A．反應柱中沒有—淀粉酶被固定

B．流速過快淀粉未被水解

C．接取的流出液是蒸餾水

D．流速過慢淀粉被水解成葡萄糖

（二）欲利用基因工程技術將人胰島素基因轉入到小鼠基因組中，以期利用小鼠生產出人胰島素，請回答：

（1）若用逆轉錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應的 細胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經過相應處理后，再利用顯微注射技術將其注入到受體細胞中，下列最不適合作為受體細胞的是

（A．受精卵B．胚胎干細胞C．第一次卵裂形成的細胞D．第三次卵裂形成的細胞）

（2）為獲得更多的受體細胞，可先對成年雌鼠注射激素進 處理,將獲得的卵母細胞培養(yǎng)成熟，與經 處理的精子結合形成受精卵后再進行后期操作。

（3）導入胰島素基因的受體細胞還需借助 、 等技術才能成為轉基因小鼠。

Answer 1

【答案】（一）（1）單菌落分離 液體（2）不溶于水 10倍體積蒸餾水 褪色 （3）D

（二）（1）胰島β細胞 B （2）超數排卵獲能 （3）胚胎體外培養(yǎng) 胚胎移植

【解析】

試題分析：（一）（1）要篩選高表達量菌株的最簡便方法可以用單菌落分離法，要進行擴大培養(yǎng)應在液體培養(yǎng)基中。

（2）利用物理或化學的方法將—淀粉酶固定后，成為不溶于水且又有酶活性的制劑。如果用吸附法固定時，在裝柱后需要用10倍體積蒸餾水緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生褪色為止。

（3）出現紅色說明淀粉在固定的淀粉酶作用下被水解，沒有出現紅色，有可能是反應柱中沒有—淀粉酶被固定，A正確。也有可能是流速過快淀粉未被水解，B正確。也有可能接取的流出液是蒸餾水，C正確。如果水解成了葡萄糖應是紅色，D錯誤。

（二）（1）胰島素的mRNA需要從胰島B細胞中獲取。動物受體細胞最好是受精卵，分化程度越低越好，胚胎干細胞已經是有所分化的細胞，B最不合適。

（2）要獲得更多的卵細胞可以用性激素進行超數排卵處理，培養(yǎng)成熟后可以與獲能的精子進行體外受精形成受精卵。

（3）將目的基因導入受體細胞后還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術才能發(fā)育成真正的個體成為轉基因小鼠。