Question

【題目】下圖為細胞融合的簡略過程示意圖，請據(jù)圖完成問題：

（1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用酶處理去掉了細胞壁，所用的酶是_________，由此生成的A和B稱為_________；A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法有離心、振動、電激。融合完成的標志是________。

（2）若A、B是動物細胞，一般取自幼齡動物的器官、組織，然后用________使其分散開來；A、B到C的過程中，常用的不用于植物細胞工程的方法是用______________誘導(dǎo)細胞融合。對融合得到的D進行大規(guī)模培養(yǎng)時需要提供的氣體環(huán)境為______________，其中CO2的作用是____________________________________________________________。此外，培養(yǎng)液還應(yīng)進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防___________________________。

（3）若A為骨髓瘤細胞，B為經(jīng)免疫的Ｂ淋巴細胞，那么D稱為_________，這種細胞既能大量繁殖，又能產(chǎn)生_________。

（4）從A、B到細胞C的過程中，可形成__________種類型的細胞（僅考慮兩個細胞間的融合）。若該過程用于單克隆抗體的制備，應(yīng)篩選出符合要求的D，方法是用特定的__________培養(yǎng)基培養(yǎng)，為了大規(guī)模的生產(chǎn)單克隆抗體，還需對D進行第二次篩選，第二次篩選的目的是____________________。

Answer 1

【答案】纖維素酶和果膠酶 原生質(zhì)體 雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 滅活的病毒 95%的空氣加5%的CO2 維持培養(yǎng)液的pH 培養(yǎng)過程中的污染 雜交瘤細胞 專一的抗體 3 選擇性 篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細胞

【解析】

分析題圖，圖為細胞融合的過程，A、B為植物細胞或動物細胞，C為正在融合的細胞，D為雜種細胞。雜種細胞含有A、B兩個細胞的遺傳物質(zhì)。動物細胞培養(yǎng)的條件包括無菌和無毒、營養(yǎng)、適宜的溫度和pH、氣體環(huán)境（95%的空氣加5%的CO2。單克隆抗體制備過程：已免疫的B細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，經(jīng)過選擇性培養(yǎng)篩選可獲得特異性雜交瘤細胞，注射到小鼠腹腔或體外細胞培養(yǎng)可獲得大量單克隆抗體。

（1）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用酶處理去掉了細胞壁，所用的酶是纖維素酶和果膠酶，去除植物細胞壁的結(jié)構(gòu)為原生質(zhì)體；A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法有離心、振動、電激。融合完成的標志是雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁。

（2）若A、B是動物細胞，一般取自幼齡動物的器官、組織，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使其分散開來；A、B到C的過程中，常用的不用于植物細胞工程的方法是用滅火的病毒誘導(dǎo)細胞融合。動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境為95%的空氣加5%的CO2，對融合得到的雜種細胞進行大規(guī)模培養(yǎng)時需要提供的氣體環(huán)境為95%的空氣加5%的CO2，其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。此外，培養(yǎng)液還應(yīng)進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。

（3）若A為骨髓瘤細胞，B為經(jīng)免疫的Ｂ淋巴細胞，圖表示單克隆抗體的制備過程，那么D稱為雜交瘤細胞，這種細胞既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。

（4）從A、B到細胞C的過程中，僅考慮兩個細胞間的融合，可形成AA、AB、BB這3種類型的融合細胞。若該過程用于單克隆抗體的制備，D為雜交瘤細胞，應(yīng)篩選出符合要求的雜交瘤細胞，方法是用特定的選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)，淘汰掉AA、BB型的融合細胞，為了大規(guī)模的生產(chǎn)單克隆抗體，因有一部分雜交瘤細胞不產(chǎn)生抗體，還需對D進行第二次篩選，所以第二次篩選的目的是篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細胞。