Question

【題目】線粒體是與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)的細(xì)胞器。為研究蛋白B對(duì)家蠶細(xì)胞凋亡的影響，科研人員做了如下實(shí)驗(yàn)。

（1）細(xì)胞色素c是線粒體內(nèi)膜上的重要電子傳遞體，參與有氧呼吸第__________階段的生化反應(yīng)。細(xì)胞受到凋亡信號(hào)的作用后，線粒體膜上的非特異性通道打開，引起線粒體膜的性發(fā)生改變，線粒體膜兩側(cè)離子的分布發(fā)生變化，導(dǎo)致線粒體膜電位下降或消失，使得細(xì)胞色素c釋放出來，引發(fā)細(xì)胞凋亡。

（2）用生物堿H處理懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞，處理不同時(shí)間后，用凝膠電泳方法測定細(xì)胞溶膠（細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）中細(xì)胞色素c的含量，結(jié)果如下圖所示。

①由于細(xì)胞中微管蛋白的表達(dá)量__________，在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以校準(zhǔn)和消除由于細(xì)胞培養(yǎng)操作、細(xì)胞取樣量和細(xì)胞色素c的__________等無關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

②據(jù)圖分析，正常細(xì)胞的細(xì)胞溶膠中__________檢測到細(xì)胞色素c，由__________判斷，隨著生物堿H處理時(shí)間延長，細(xì)胞色素c逐漸釋放到細(xì)胞溶膠中。

（3）為研究蛋白B的功能，科研人員構(gòu)建蛋白B基因過量表達(dá)載體和蛋白B基因表達(dá)干擾載體，導(dǎo)入懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞中，用__________處理轉(zhuǎn)基因家蠶細(xì)胞，檢測到過量表達(dá)蛋白B的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量減少，抑制蛋白B基因表達(dá)的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量顯著增加，推測蛋白B______________________________。

Answer 1

【答案】 三 （離子）通透 相對(duì)穩(wěn)定（且豐富） 檢測方法 沒有（或“未能”） 細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c含量增加，分享的線粒體中細(xì)胞色素c含量下降 生物堿H 抑制細(xì)胞色素c的釋放，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡

【解析】試題分析：本題以為了研究蛋白B對(duì)家蠶細(xì)胞凋亡的影響，科研人員所作的實(shí)驗(yàn)為題材，考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能、基因工程操作步驟等知識(shí)，識(shí)記細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能、明確基因工程的操作步驟，再結(jié)合題意作答。

（1）有氧呼吸第三階段的場所是線粒體內(nèi)膜，由細(xì)胞色素c是線粒體內(nèi)膜上的重要電子傳遞體，可推測細(xì)胞色素c參與有氧呼吸第三階段的生化反應(yīng)；細(xì)胞受到凋亡信號(hào)的作用后，線粒體膜上的非特異性通道打開，會(huì)引起線粒體膜的（離子）通透性發(fā)生改變，線粒體膜兩側(cè)離子（和質(zhì)子）的分布發(fā)生變化，導(dǎo)致線粒體膜電位下降或消失，使得細(xì)胞色素c 釋放出來，引發(fā)細(xì)胞凋亡。
（2）①在用生物堿H處理懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞，處理不同時(shí)間后，用凝膠電泳方法測定細(xì)胞溶膠（細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）中細(xì)胞色素c的含量的實(shí)驗(yàn)中，由于細(xì)胞中微管蛋白的表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定（且豐富），所以在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以校準(zhǔn)和消除由于細(xì)胞培養(yǎng)操作、細(xì)胞取樣量和細(xì)胞色素c的檢測方法等無關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
②分析題圖可知，正常細(xì)胞的細(xì)胞溶膠中沒有（或“未能”）檢測到細(xì)胞色素c，而據(jù)細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c含量增加，分離的線粒體中細(xì)胞色素c含量下降可判斷，隨著生物堿H處理時(shí)間延長，細(xì)胞色素c逐漸釋放到細(xì)胞溶膠中。
（3）為研究蛋白B的功能，科研人員構(gòu)建蛋白B基因過量表達(dá)載體和蛋白B基因表達(dá)干擾載體，導(dǎo)人懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞中，用生物堿H處理轉(zhuǎn)基因家蠶細(xì)胞，檢測到過量表達(dá)蛋白B的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量減少，而抑制蛋白B基因表達(dá)的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量會(huì)顯著增加，據(jù)此可推測蛋白B抑制細(xì)胞色素c的釋放，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡。