Question

【題目】已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

（1）實驗步驟①所代表的反應過程是__________________________________。

（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制鞋內切酶和酶，后者的作用出是將限制性內切酶切割的_________和___________連接起來。

（3）如果省略步驟③而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能_____________，也不能_________________________。

（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用_________與___________進行抗原一抗體特異性反應實驗，從而得出結論。

（5）步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基序列_____________（相同、不同），根本原因是____________________________________。

Answer 1

【答案】（1）感受態(tài) （2）DNA連接 載體 S基因 （3）復制 合成S基因的mRNA（或轉錄）

（4）大腸桿菌中表達的S蛋白 SARS康復病人血清（5）相同 表達蛋白質所用的基因相同

【解析】試題分析：（1）目的基因表達載體導入微生物細胞需要用Ca2+處理，使之處于易于接受外源DNA的感受態(tài)。

（2）根據目的基因表達載體要用限制酶切割質粒，使之具有與目的基因相同的粘性末端，再用DNA連接酶將質粒粘性末端和目的基因連接為重組質粒。

（3）如果直接將目的基因導入受體細胞，會被分解，不能保存、復制和表達。

（4）將S蛋白與抗S蛋白的特異性抗體進行抗原—抗體特異性反應實驗，如果形成雜交帶，說明S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性。

（5）由于都是S基因，表達的S蛋白質相同。