Question

【題目】某研究性學(xué)習(xí)小組利用熒光素﹣熒光素酶生物發(fā)光法，測(cè)定人參愈傷組織中ATP的含量，以研究人參細(xì)胞能量代謝的特點(diǎn)．
【實(shí)驗(yàn)原理】熒光素在熒光素酶、ATP等物質(zhì)參與下，進(jìn)行反應(yīng)發(fā)出熒光；用分光光度計(jì)可測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度；當(dāng)熒光素和熒光素酶都足量時(shí)，在一定范圍內(nèi)，ATP的含量與發(fā)光強(qiáng)度成正相關(guān)．
【實(shí)驗(yàn)步驟】
Ⅰ，ATP的提�。悍Q取一定量的人參愈傷組織，研磨后沸水浴10min，冷卻至室溫，離心，取上清液．
Ⅱ，ATP的測(cè)定：吸取一定量的上清液，放入分光光度計(jì)反應(yīng)室內(nèi)，并注入適量的所需物質(zhì)，在有氧等適宜條件下進(jìn)行反應(yīng)，記錄發(fā)光強(qiáng)度并計(jì)算ATP含量．請(qǐng)回答：
（1）步驟Ⅰ中的沸水浴處理，使酶的被破壞而失活．
（2）步驟Ⅱ中記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果為 ， 分光光度計(jì)反應(yīng)室內(nèi)能量的轉(zhuǎn)換形式是 ．
（3）熒光素酶價(jià)格昂貴，為能準(zhǔn)確測(cè)定出ATP的含量，又能節(jié)省酶的用量，學(xué)習(xí)小組探究了“測(cè)定ATP時(shí)所需熒光素酶溶液的最佳濃度”，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖．
①研究小組配制了1×10﹣8mol/LATP標(biāo)準(zhǔn)液，70mg/L熒光素溶液（過量）和溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)．
②結(jié)果分析：該實(shí)驗(yàn)的自變量為 ， 圖中點(diǎn)對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度是最佳的酶濃度，圖中e、f、g點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度不同，但發(fā)光強(qiáng)度相同，這是因?yàn)?/span> ．

（4）ATP測(cè)定對(duì)食品衛(wèi)生監(jiān)控有重要意義．食品衛(wèi)生檢驗(yàn)人員利用上述生物發(fā)光法測(cè)定某熟食品樣品中細(xì)菌的ATP總含量，測(cè)算出了細(xì)菌的數(shù)量，從而判斷食品污染程度．做出上述判斷的理由是：每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP的含量 ．

Answer 1

【答案】
（1）空間結(jié)構(gòu)
（2）發(fā)光強(qiáng)度；化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能
（3）濃度分別為0，10，20，30，40，50，60mg/L熒光素酶；熒光素酶濃度；e；ATP全部水解（或ATP數(shù)量限制）
（4）大致相同（且相對(duì)穩(wěn)定）
【解析】解：（1）沸水浴處理時(shí)，高溫能夠使酶分子空間結(jié)構(gòu)被破壞，使酶的活性永久喪失．（2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理：熒光素在熒光素酶、ATP等物質(zhì)參與下，進(jìn)行反應(yīng)發(fā)出熒光．所以，步驟二中記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果為發(fā)光強(qiáng)度，分光光度計(jì)反應(yīng)室內(nèi)能量的轉(zhuǎn)換形式是化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能．（3）①由圖解的橫坐標(biāo)可知實(shí)驗(yàn)中熒光素酶溶液濃度分別為0、10、20、30、40、50、60 mg/L，和70mg/L的熒光素溶液（過量）溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)．②該實(shí)驗(yàn)的自變量為熒光素酶濃度，結(jié)果表明：圖中e、f、g點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度不同，但發(fā)光強(qiáng)度相同，表明達(dá)到e點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度時(shí)，ATP已經(jīng)全部水解，即使繼續(xù)增加酶濃度，由于受ATP數(shù)量限制，發(fā)光強(qiáng)度也不再增加，因此e點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度為最佳濃度．（4）每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP的含量大致相同且相對(duì)穩(wěn)定，可以根據(jù)樣品中細(xì)菌的ATP總含量，測(cè)算出細(xì)菌的數(shù)量．
所以答案是：（1）空間結(jié)構(gòu)（2）發(fā)光強(qiáng)度 化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能（3）①濃度分別為0，10，20，30，40，50，60mg/L熒光素酶 ②熒光素酶濃度 e ATP全部水解（或ATP數(shù)量限制）（4）大致相同（且相對(duì)穩(wěn)定）