Question

下圖是利用質(zhì)粒（有抗四環(huán)素基因、抗氨芐青霉素基因和Sal I、BamH I、Hind Ⅲ三種限制酶切割位點(diǎn)）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：

（1）將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是           。從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用          技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

（2）如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能               ，也不能合成抗鹽基因的mRNA。

（3）為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的             作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

（4）圖中將抗鹽基因?qū)�入質(zhì)粒，需用             限制酶對質(zhì)粒和                 進(jìn)行切割。

（5）煙草組織細(xì)胞具有                 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗鹽基因的煙草組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的              、                    。在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞的新陳代謝類型是                 。

Answer 1

(1) 基因重組（1分）    PCR （1分）

(2) 復(fù)制（2分）  

(3) 抗鹽基因（2分）

(4) Sal I和Hind III（2分）   含抗鹽基因的DNA  （2分）

(5) 全能性（1分）   脫分化（1分）    再分化（1分）     異養(yǎng)需氧型（2分）

考查基因工程的知識。BamHI的酶切位點(diǎn)在目的基因（抗鹽基因）中。若用此限制酶，會破壞目的基因的結(jié)構(gòu)，最終得不到轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草，所以選用 SalⅠ和HindⅢ對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割。由于SalⅠ和HindⅢ的酶切位點(diǎn)在抗四環(huán)素基因中。在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，抗四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)遭到破壞，故只能在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素來篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可將植物細(xì)胞培育成完整的植株。植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織經(jīng)細(xì)胞增殖和分化形成完整植株，此過程須向培養(yǎng)基中加入植物激素（如生長素和細(xì)胞分裂素）。